在Western Bloting实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。当然除了GAPDH抗体,β-Actin抗体、β-Tubulin抗体等也是最常见的内参抗体。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
选择合适的GAPDH抗体显得尤为重要,首先GAPDH的WB检测条带大约为36kDa,因此对于一些待检测分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤为合适。一般来说,国产的抗体在质量稳定性、效价等方面存在不足,但是进口品牌如Abcam、Millipore、CST等价格偏高,一般在¥3000/100ul左右。下面我们为您推荐三款GAPDH原装进口抗体。美国Abbkine的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody(货号A01020)是小鼠源的单抗,其效价很高,厂商推荐的WB起始稀释比率为1:1000,实际应用过程中,有使用1:10000或更高的报告,远远高于此稀释比率,说明其免疫效价很高,另外,其检测种属也很多,包括人、牛、猪、小鼠、大鼠等。右图为Abbkine的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody(货号A01020)在不同细胞系内WB的检测结果。
货号 | 品牌 | 品名 | 来源 | 应用类型 | 特点 | 说明书 |
A01020 | Abbkine | Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5) | 小鼠 | WB, IHC | 效价极高,检测种属多 | 点击 |
A01025 | Abbkine | HRP, Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) | 小鼠 | WB | 排除二抗干扰 | 点击 |
Abbkine的HRP, Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) (货号A01025)则是一款HRP直标的小鼠源单克隆GAPDH抗体,由于是HRP直接标记,因此不会受到二抗的干扰,在一些IP应用中非常合适,可有效排除IP-WB时的重链干扰。左图为Abbkine的GAPDH Monoclonal Antibody(货号A01020)抗体在石蜡包埋、福尔马林固定的切片上的应用。
更多GAPDH内参抗体以及其他如Actin、Tubulin等其他内参抗体,请电话垂询。美国Abbkine品牌是一 家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的品牌,艾美捷将其引入中国,作为其中国区域代理,将为客户提供最具性价比的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家国际知名品牌的的中国代理或区域代理,能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣,请致电全国免费电话400-6800-868 转801/802/803 或者027-84454412/4876 到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。
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