因子 V 是一种大的单链血浆糖蛋白,是血液凝固级联反应的重要组成部分。 在凝血过程中,前因子 V 因子通过丝氨酸蛋白酶 a-凝血酶(如上所示)的有限蛋白水解转化为活性辅因子 Va 因子,Xa 因子的效率较低。 活性辅助因子由 NH2 末端衍生的重链(Mr = 94,000)和 COOH 末端衍生的轻链(Mr = 74,000)组成,它们在钙离子存在的情况下保持非共价结合。 因子Va作为丝氨酸蛋白酶因子 Xa 的辅助因子。Va 因子和 Xa 因子以非共价和钙离子依赖性方式聚集在磷脂表面,形成凝血酶原复合物。 凝血酶原复合物负责将酶原凝血酶原快速转化为活性丝氨酸蛋白酶α-凝血酶。 凝血酶原复合物的组装使凝血酶原转化为凝血酶的速率比单独使用因子 Xa 的速率提高近 300,000 倍。 凝血酶原复合物的下调部分是通过活化蛋白 C 使因子 Va 失活来实现的。人因子 V 是使用免疫亲和层析从新鲜冷冻人血浆中制备的,如 Katzmann及其同事所述。牛因子V是使用 Nesheim 及其同事所述的常规色谱技术从新鲜牛血浆中制备的。 纯化的因子 V 以 50%(体积/体积)甘油/水的形式提供,应储存在 -20°C 下。 通过 SDS-PAGE 分析确定纯度,并在因子 V 凝血测定中测量活性。