美国Nanoprobes公司成立于1990年,专门生产免疫金标记和免疫测定试验产品。主要为广大科研机构提供用于检测生物分子的最灵敏的试剂和技术。Nanoprobes公司独特的金标技术使用化学交联的金属簇和纳米颗粒作为标签。与胶体金颗粒静电吸附在抗体和蛋白质上的传统免疫金探针不同,Nanoprobes公司的金标是与生物分子在特定位点交联的不带电荷的分子,故其探针具有胶体金不具备的范围和灵活性。Nanoprobes标签可以附着在任何带有反应基团的分子上,比如蛋白质、多肽、寡核苷酸、小分子和脂类等,以检测和定位这些分子。其金标也可以和其他标签结合,一起使用。Nanoprobes独特的荧光纳米金探针在一个探针中结合了纳米金(Nanogold)和荧光素,用于荧光和电镜两种技术共同进行样品成像。
新探针可基于天然生物分子的任何一个片段设计制作,标签可定位于远离结合位点处从而不影响探针与目标位点的结合。Nanoprobe的1.4nm纳米金探针已被超过250篇文献引用。
Nanoprobe公司独家生产和销售独特的产品Nanogold?及结合了荧光与免疫金探针的FluoroNanogold。另外还生产一个完整的3、5、10、15、30nm纳米金探针的产品系列,和一个包括具有独特优点的银增强和负染试剂产品系列,公司产品畅销全球。
主要产品线:
1、纳米金(Nanogold?)颗粒:
结合了抗体/荧光标记/脂类/链霉亲和素的纳米金、带不同反应基的纳米金颗粒、3-5nm/2-4nm/0.8nm/1.4nm, 带正电/负电/不带电荷,亲水/疏水的纳米金颗粒、Undecagold (Au11)
2、金增强/银增强试剂
3、EnzMet?-替代HRP底物,检测灵敏度高,分辨率高,用于原位杂交/免疫组化/显微系统/免疫斑点/蛋白杂交等
4、检测His标签重组蛋白的Ni-NTA纳米金和Goldiblot(用于蛋白杂交)
5、负染试剂:NanoVan(钒),Nano-W(有机钨)
6、X-射线造影剂:AuroVist?, EnzMet?
1、纳米金(Nanogold?)颗粒
①纳米金结合物:共价结合了Fab’/IgG/链酶亲和素/荧光/脂质/不同反应基团的纳米金,是市面上最小的免疫金标探针,优于胶体金
应用类型及实例:
原位杂交(ISH),电子显微镜,光学和共聚焦显微镜,免疫印迹和IHC,凝胶染色Nanogold标记条带
ISH(原位杂交)检测:SiHa细胞中HPV 16的单拷贝 | 电镜检测:单马来酰亚胺标记的Nanogold(箭头)特异性结合在IgG分子上铰链的硫醇位点。 |
光学显微镜检测:纺锤体Tubulin标记,左:胶体金标记;右:Nanogold(纳米金) | 免疫印迹检测:Nanogold?-抗小鼠Fab'检测小鼠IgG,实现了前所未有的灵敏度(0.1pg灵敏度) |
优点:
1)金颗粒与Fab’或IgG比例接近1
2)粒径小(4nm),且均匀
3)低背景
4)灵敏度高
5)稳定
纳米金(Nanogold?)颗粒产品推荐有标记上纳米金(Nanogold)的二抗及链霉亲和素;同时标记上纳米金(Nanogold)和荧光的二抗;标记上纳米金(Nanogold)的脂类、带不同反应基团的纳米金(Nanogold)颗粒等
② 3-5nm/2-4nm/0.8nm/1.4nm, 带正电/负电/不带电荷,亲水/疏水的纳米金颗粒:用带化学基团的不同配基包被和稳定,溶解性不同
应用:在多种系统和环境中的应用广泛
③ Undecagold (Au11):比纳米金(Nanogold)小,直径仅0.8nm。适用于*高分辨率电镜(如扫描透射电镜)或透射电镜与图像处理结合的技术。单个聚合物在TEM下通常不能被直接观测到,染色更慢,与纳米金相比,银沉积的量更少。因此在很多应用中,建议选用纳米金而非Undecagold。
2、金增强/银增强试剂
3、EnzMet? - 新的生物标记和染色方法(Nanoprobe研发的砖利产品),使用酶探针选择性的将银沉积在目标位置,可替代HRP底物。
应用:
可替代HRP底物,用于原位杂交(ISH)/免疫组化/电镜/关联显微系统/免疫斑点/蛋白杂交等
优点:
①染色清晰度优于传统生色或荧光底物,长久不褪色,不扩散
②可检测内源单拷贝基因(原位杂交中),高灵敏度
③高分辨率
④背景接近零
⑤无需更多处理,染色即在电镜下可见
检测原理:
EnzMet应用于免疫组化(IHC)过程中的原理 | EnzMet?用于原为荧光杂交(ISH)检测的原理 |
应用实列展示:
免疫组化(IHC):石蜡包埋的人膀胱腺癌细胞角蛋白DAB染色(右)与EnzMet染色(右)对比。 | 免疫组化(IHC):DAB(左)EnzMet(右)染HER2扩增的组织 | 原位荧光杂交(FISH):人类乳腺癌活检组织切片,其中Her 2/neu基因的单拷贝(每个正常细胞2个)通过EnzMet检测(黑点),类似于FISH。然而,EnzMet能够实现明场检测、永久信号,并使用全强度H&E染色同时显示基础组织形态。 |
相关产品推荐:
品名 | 产品描述 | 货号 | 规格 |
EnzMet? IHC / ISH HRP Detection Kit | 专为免疫组化和原位杂交优化的HRP检测试剂盒 | 6001 | 150张载玻片 30ml |
EnzMet? Western Blot HRP Detection Kit | 在蛋白杂交中获得*高灵敏度的EnzMet | 6002 | 100ml |
EnzMet? for General Research Applications | 普通实验用的EnzMet | 6010 | 45ml |
4、Ni-NTA纳米金和Goldiblot(用于蛋白杂交)– 特异性标记His标签蛋白:
①Ni-NTA纳米金
应用:
透射电镜/扫描透射电镜、光学显微镜、蛋白杂交、纯化His标签蛋白时,识别含目的蛋白的部分等实验。
优点:
1)灵敏度高
2)探针小,分辨率高,8 nm Ni-NTA-纳米金比抗体探针小
3)高溶解度,稳定
4)无背景
5)长久染色
6)5 nm Ni-NTA-纳米金在电镜下可见,不需金增强/银增强
7)使用简单
应用实例展示:
左:1.8nm Ni-NTA-纳米金与His标签蛋白相互作用 右:用Ni-NTA-纳米金标记6xHis腺病毒Knob蛋白,未染色的扫描电镜照片 | 上:5nm Ni-NTA-纳米金的结构,显示金属螯合物与His标签蛋白结合 下:5nm Ni-NTA-纳米金的扫描电镜图,平均直径5.11±0.84nm |
② Goldiblot(用于蛋白杂交)
应用:
1.蛋白杂交检测带His标签的重组蛋白(染色时间1小时)
2.识别细胞裂解液或提取物中的His标签蛋白
3.证实转染细胞中His标签蛋白的表达
优点:
1)更快更灵敏:1小时出结果,1ng灵敏度
2)低背景
3)长久信号
检测带His标签蛋白灵敏度低至1ng |
5、负染试剂:
NanoVan(钒)可用于标准负染,建议用于纳米金标记的样品,使1.4nm极小的纳米金清晰可见,而高原子数的染料使其模糊。
Nano-W(有机钨)扩展性优良,密度高,对比度高,可与NanoVan混合得到中等密度负染试剂。
6、AuroVistTM :X-射线造影剂:
注射AuroVist 15 nm X射线造影剂后小鼠体内微CT | 静脉注射 AuroVist?-15nm后,活体小鼠腿部和骨盆区域周围的20?m血管。(血管造影) |
静脉注射 AuroVist-15 nm后活体小鼠大脑的微型CT。 由于 AuroVist-15nm穿透受损的血脑肿瘤屏障, 肿瘤突出(白色密度) 。 右图:通过计算去除颅骨,露出脑血管系统 |
优点:
1)用于活体,不破坏组织
2)低毒性,LD50 >5.0 g Au/kg
3)高对比度,比碘造影剂高3倍
4)显微CT可成像直径为20um的血管
5)9nm纳米金在血液中存留时间比碘造影剂长,可达24h
6)使用浓度可比碘造影剂高4倍多
7)高浓度时渗透压低
8)低粘度,可注射
9)肾脏将其清除
作为Nanoprobes在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供Nanoprobes优质的产品与服务。下图为Nanoprobes公司授权艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc.)作为Nanoprobes在中国区域的代理授权书:
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