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  • 蛋白质印迹—蛋白转膜和染色

    蛋白显色的阶段非常重要,可以知道蛋白迁移的是否均匀、平坦。如果分离后的蛋白需要转膜,就用铜染,因为考马斯蓝染色是不可逆的。 考马斯蓝染色只用来检测转移的有效性,或者蛋白不需要转膜时,只用于观测蛋白 SDS-PAGE 分离的结果。

    2021-05-08
  • 蛋白质印迹—电泳

    电泳可以是单相的(即一维分离)也可以是双相的。单相电泳常用来进行蛋白和核酸的分离,蛋白的双相电泳用于指纹-识别(即总蛋白成分分析)和细胞里所有蛋白的精确定位。这里我们所描述的是单相电泳技术。

    2021-05-08
  • 蛋白质印迹—样品准备和蛋白质浓度的测定

    准备凝胶电泳的样品,需要对细胞和组织进行裂解以释放目的蛋白,这些可溶性蛋白能够穿过分离胶单独移动。裂解缓冲液有很多种,但用 来做 WB试验的仅有少数几种。简单来说,它们溶解蛋白的能力不同,含有十二烷基硫酸钠和其他离子型去污剂的溶解能力最强。

    2021-05-08
  • 荧光染色

    由于其独特的电子构型,荧光物具有典型的吸收(激发)和发射光谱。

    单一染色在特定波长被激发,在另外一个波长发射光子。

    复合染色由距离非常近的、能量可以在彼此之间传递的一个供体及一个受体荧光物分子所组成。复合染色在受体分子的激发波长

    被激发,在 供体分子的发射波长发射一个光子

    2021-05-07
  • 抗体选择和稀释比度

    Abcam 网站有一个搜索功能。在搜索框中输入蛋白或其它靶物质的名称,就会出现一个列表,可以通过产品类型、目的、实际用途、特异反应性、宿主种类、克隆性和结合情况进行筛选。

    2021-05-07
  • 抗体形式及抗体纯化

    对于血清、腹水和组织培养上清的澄清,离心和过滤是基本的实验室技术。这些技术可以去除会阻塞层析柱的脂类和小颗粒
    物质。对于某些 样品,缓冲液置换和除盐也是必要的步骤。硫酸铵沉淀作为更进一步的预处理步骤,经常用于浓缩腹水中的免疫
    球蛋白。

    2021-05-07
  • 抗体和抗体的结构

    抗体,也叫免疫球蛋白 (Ig),是一种能特异性结合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染动物体内引发抗体产生的物质。在体内,抗体是由于外源性分子的侵袭而产生的。抗体以一个或者多个 Y

    2021-05-07
  • AI学术引擎Semantic Scholar

    小艾同学为您推荐一个科研人必备的学术搜索平台:Semantic Scholar,无需翻墙免费可用!基于人工智能自主学习的学术搜索引擎,可以快速筛选出相关有用内容,且能在一定程度上理解这些内容。同时还能展示相关主题历年文章发表量趋势,相关主题推荐内容等,值得一试!

    2021-04-30
  • PDF相关小知识

    PDF(Portable Document Format,便携式文档格式)是由Adobe用于与应用程序、操作系统、硬件无关的方式进行文件交换所发展出的文件格式。PDF文件以PostScript语言图象模型为基础,无论在哪种打印机上都可保证精确的颜色和准确的打印效果,即PDF会忠实地再现原稿的每一个字符、颜色以及图象。


    2021-04-30
  • Bio-protocol-101:优秀可靠免费的实验方法库

    Bio-101是Bio-protocol 旗下一个生命科学基础实验方案的在线数据库。对,没错,就是那个跟AAAS(美国科学促进会,顶级学术期刊《科学》及其系列期刊的非营利出版方)的生命科学实验方案共享平台Bio-protocol。

    2021-04-30
  • 蛋白质胞内胞外分布预测

    众所周知,在细胞膜或者膜结构上有很多跨膜蛋白,它们有些片段在细胞外,有些片段在细胞内,分别发挥着不同的功能。对于研究比较程度的蛋白指标而言,小伙伴们都可以通过成熟的数据库平台进行查阅,比如:我们的老朋友平台:Uniprot


    2021-04-30
  • 等电点计算(pI)—蛋白质研究必备

    蛋白质研究必备:等电点计算(pI)蛋白质研究的小伙伴们肯定经常接触到一个名词,等电点(isoelectric point)。当蛋白质处于某一pH环境中,所带正、负电荷恰好相等,即净电荷为零,呈兼性离

    2021-04-30
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