酶联免疫吸附试验(ELISA)
碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液(100mM) pH9.6
抗原或抗体应用包被缓冲液稀释,以使其固定在孔内:
? 29mM 碳酸钠
? 71mM 碳酸氢钠
封闭液:
常用的封闭试剂为1% 牛血清白蛋白、血清、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶,用PBS 溶解。
洗涤液:
常用PBS 或含去垢剂(如体积百分数0.05% 吐温20)的三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH 7.4) (TBST)
抗体稀释缓冲液:
一抗和二抗应用1 倍的封闭液稀释,以减少非特异结合。
流式细胞术
荧光激活细胞分类检测(FACS)缓冲液/抗体稀释缓冲液
10% 胎牛血清
1% 叠氮化纳
溶解于PBS 中
细胞穿透液
0.1-1% 聚乙二醇辛基苯基醚/乙基苯基聚乙二醇
溶解于PBS 中,也可用吐温20,皂甙,洋地黄皂甙和Leucoperm 等温和的细胞膜溶解物。使用浓度0.5%,溶解于PBS 中
固定液
0.01%-0.1% 多聚甲醛,溶解于PBS 中
免疫沉淀(IP)
缓冲液配制方法见免疫印迹(western blot)部分
RIPA(放射性免疫测定)缓冲液
缓冲液配制方法见免疫印迹部分
染色质免疫沉淀(ChIP)
FA裂解缓冲液
50mM 羟乙基哌嗪乙磺酸-氢氧化钾,pH 值7.5
140mM 氯化钠
1mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0
1% 的聚乙二醇辛基苯基醚
0.1% 的去氧胆酸钠
0.1% 十二烷基硫酸钠
蛋白酶抑制剂
RIPA(放射性免疫测定)缓冲液
50mM 三羟甲基氨基甲烷-氯化氢,pH 值8.0
150mM 氯化钠
2mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0
1% 乙基苯基聚乙二醇
0.5% 去氧胆酸钠
0.1% 十二烷基硫酸钠
蛋白酶抑制剂
洗涤缓冲液
0.1% 十二烷基硫酸钠
1% 的聚乙二醇辛基苯基醚
2mM 的乙二胺四乙酸,pH 值8.0
150mM 的氯化钠
20mM 三羟甲基氨基甲烷-氯化氢,pH 值8.0
末次洗涤缓冲液
0.1% 十二烷基硫酸钠
1% 聚乙二醇辛基苯基醚
2mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0
500mM 氯化钠
20mM 三羟甲基氨基甲烷-氯化氢,pH 值8.0
洗提缓冲液
1% 十二烷基硫酸钠
100mM 碳酸氢钠
蛋白酶K
用蒸馏水溶解,浓度为20mg/ml,-20°C 冻存。
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