完全弗氏佐剂（CFA）使用建议及应用说明

弗氏佐剂旨在提供释放刺激强细胞所必需的抗原持续的免疫反应。CFA的使用应负责任且谨慎以避免或尽量减少过度炎症。对于大多数应用程序，CFA通常仅用于初始免疫，而IFA是选择后续免疫接种。

完全弗氏佐剂（CFA）是一种油包水每毫升含1毫克热杀干乳剂结核分枝杆菌。CFA和IFA使用最多的佐剂广泛应用于实验免疫学。完成弗氏佐剂在实用的兽医疫苗接种。CFAVax由矿物油和乳化剂的混合物组成以85%v/v油和15%v/v乳化剂的比例。每10个mL CFA小瓶含有10 mg分枝杆菌。

重要的是，CFAVax不是预先形成的乳液因此它必须与相等体积的抗原水溶液，随后乳化在使用之前。乳化剂是单油酸曼尼酯由甘露醇作为亲水残基组成的酯和油酸（不饱和C18脂肪酸）作为疏水部分。即使油的作用机制乳液仍然鲜为人知，一些证据建议对NOD2进行部分要求。此外，这些乳液在注射，从而在坏死细胞死亡也可能是它们的佐剂活动免疫反应显著增强分枝杆菌成分的存在吸引巨噬细胞和免疫细胞注射CFA主要诱导Th1应答可引起肉芽肿和严重炎症接种部位的反应。

艾美捷完全弗氏佐剂（CFA）#OZB-CFA0100启动前的建议：

接种物应无外来微生物污染在与推荐使用佐剂。含有完全弗氏佐剂的注射剂应皮下注射：建议将将含有佐剂的接种物分成若干部分在小鼠或大鼠中每个部位注射超过0.1毫升，0.25毫升每个兔子的位置。如果在进行这些操作时导致皮肤坏死指导方针，未来的注射应该间隔更远。

1.使小瓶涡旋以重新悬浮分枝杆菌。

2.在3毫升鲁尔胶中制备1毫升CFAVax佐剂注射器

3.在盐水缓冲液或磷酸盐缓冲液中稀释抗原混合物最终免疫原浓度为10-100?g/100?L（足以免疫小鼠、大鼠和兔子）。

4.在3毫升鲁尔锁式塑料注射器中制备1毫升抗原

5.形成乳液：

a.使用双端锁定连接两个注射器连接器

b.来回按压注射器筒，转移内容物从一个注射器到另一个。白色乳液应该立即形成

c.混合5至10分钟：产生稳定的乳液

d.所得乳液应呈现白色，稳定落入水中时不应散开

注：对于较小的体积，可以通过以下方式进行长时间混合有力地吸吮或涡旋。对于较大的体积，请使用纸巾均化器以形成乳液。

6.在连接之前，分离注射器并排出空气针（小鼠或大鼠21g；兔子19g）

7.根据下表向动物体内注射；这个体积取决于注射部位。

8.有必要将多个注射部位隔开一段距离足以避免炎性病变合并。

注：弗氏佐剂的优先给药途径应为皮下，因为它破坏性较小。可以使用其他路线：肌内、皮内或腹膜内。

完全弗氏佐剂（CFA）应用：

与引发Th2反应的IFA相反，CFA主要诱导Th1反应。分枝杆菌成分在注射部位吸引巨噬细胞和免疫细胞参与强烈的炎症反应。弗氏佐剂旨在提供刺激强持续免疫反应所必需的抗原的持续释放。对于大多数应用，CFA通常用于初始免疫，而IFA是后续免疫的首选佐剂。

推荐用于：刺激Th1反应，初始免疫，抗体产生。

SC =SC = Subcutaneous, IM = Intramuscular, ID = intradermal, IP = intraperitoneal,

IV = IV = intravenous, N.R. = not recommended, N.A. = not acceptable

弗氏推荐量每个注射途径的佐剂/抗原乳液不同的动物种类（改编自Hendriken CFM et Hau J.，2003，载于《实验动物科学手册》卷I） 。

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