Reddot Biotech大鼠促甲状腺激素 (TSH) ELISA试剂盒化验程序

大鼠促甲状腺激素 (TSH) ELISA试剂盒是一种夹心酶免疫分析法，用于大鼠血清、血浆和其他生物液体中TSH的体外定量测量。  

  作为Reddot Biotech全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Reddot Biotech热销产品大鼠促甲状腺激素 (TSH) ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

大鼠促甲状腺激素 (TSH) ELISA试剂盒：

样本采集和存储：

• 血清-使用血清分离管，使样品在室温下凝结2小时或在4°C下过夜，然后在约1000×g离心20分钟。立即测定新鲜制备的血清，或将样品储存在-20°C或-80°C的等分试样中，以备日后使用。避免重复冷冻/解冻循环。

• 血浆-使用EDTA或肝素作为抗凝剂收集血浆。在收集后30分钟内，在2-8°C下以1000×g离心样品15分钟。立即取出血浆并进行化验，或将样品储存在-20°C或-80°C的等分试样中，以备日后使用。避免重复冷冻/解冻循环。

• 其他生物流体.在1000×g条件下离心样品20分钟。去除颗粒并立即测定或在-20°C或-80°C条件下将样品储存在等分试样中。避免重复冷冻/解冻循环。

  注：

• 5天内使用的样品可在4°C下储存，否则样品必须在-20°C（≤1个月）或-80°C（≥2个月）下储存，以避免生物活性损失和/或污染。

• 明显的溶血会影响抗体抗原反应。有溶血迹象的样品不可用于本试验。进行分析时，将样品置于室温

大鼠促甲状腺激素 (TSH) ELISA试剂盒化验程序：

• 确定稀释标准、空白和样品的孔。准备7个标准孔，1个空白孔。将100μL标准溶液（参见试剂制备）、空白溶液和样品分别加入适当的孔中。用板密封剂覆盖。在37°C下孵育90分钟。

• 从每个井中取出液体，不要清洗。

• 向每个孔中加入100μL检测溶液A。用平板密封剂覆盖后，在37°C下孵育45分钟。

• 吸入溶液，并使用喷射瓶、多通道移液管、歧管分配器或自动清洗机，用300μL 1×清洗溶液清洗每个孔，并静置1-2分钟。通过在吸水纸上轻敲板，将所有孔中的剩余液体完全清除。彻底清洗3次。最后一次洗涤后，通过抽吸或滗析去除剩余的洗涤缓冲液。翻转盘子，用吸水纸吸住。

• 向每个孔中加入100μL检测溶液B。用平板密封剂覆盖后，在37°C下孵育45分钟。

• 如步骤4所述，重复抽吸/洗涤过程共5次。

• 向每个孔中加入90μL基质溶液。用新的板材密封剂覆盖。在37°C下培养15-25分钟（不要超过30分钟）。避光。加入基质溶液后，液体将变为蓝色。

• 向每个孔中加入50μL停止溶液。加入停止溶液后，液体将变黄。轻敲盘子的侧面，混合液体。如果颜色变化不均匀，轻轻拍打盘子以确保充分混合。

• 去除盘子底部的水滴和指纹，并确认液体表面没有气泡。运行微板读取器，立即在450 nm处进行测量。

注：

• 化验准备：为每个实验保留适当数量的孔，并从微量板上移除多余的孔。剩余的井应重新密封并储存在-20°C。

• 样品或试剂添加：请使用新制备的标准品。小心地向孔中加入样品，并轻轻混合以避免起泡。不要触摸井壁。对于程序中的每个步骤，将试剂或样品添加到测定板的总分配时间不应超过10分钟。这将确保每个移液步骤的经过时间相等，不会中断。虽然不需要，但建议复制所有标准和试样。为避免交叉污染，在添加标准品、样品和试剂之间更换移液管尖端。此外，对每种试剂使用单独的容器。

• 孵育：为了确保准确的结果，孵育步骤中需要适当粘附板密封剂。在培养步骤之间，不要让井长时间处于未覆盖状态。一旦试剂添加到孔条中，在测定过程中任何时候都不要让孔条干燥。必须控制培养时间和温度。

• 清洗：清洗程序至关重要。在每个步骤中完全去除液体对于良好的性能至关重要。最后一次洗涤后，通过抽吸或滗析去除剩余的洗涤液，并去除盘子底部的水滴或指纹。洗涤不足将导致精度差和错误的吸光度读数升高。

• 反应时间的控制：添加TMB底物后观察颜色的变化（例如，每10分钟观察一次），如果颜色太深，请提前添加停止溶液，以避免反应过强，从而导致吸光度读数不准确。

• TMB基板对光敏感，容易被氧化剂污染。请保护其免受光照和潜在污染源的影响。

• 环境湿度可能影响从试剂盒获得的结果。如果设施内的湿度低于60%，建议使用加湿器

Reddot Biotech是由一支拥有35年医疗管理经验团队创办的加拿大本土品牌，其已在ELISA产品线上深耕7个年头，并且仍在不断前进中。产品的质量保证也让其越来越多被“收纳进”文献当中，产品线包括ELISA试剂盒、抗体、少量生化试剂，其中ELISA试剂盒超过6000+，物种类型较多：人；大鼠；小鼠；犬科类；牛科；鱼；鸡；猪；兔；山羊；绵羊；猿；马；豚鼠等，像激素类指标促卵泡素（FSH）、促黄体激素（LH），新冠相关病毒受体ACE2、ACE以及肿瘤免疫相关的指标精氨酸酶（ARG）等已是热门应用指标。