Reddot Biotech猪胰蛋白酶 (TRY) ELISA试剂盒试剂制备方案

猪胰蛋白酶 (TRY) ELISA试剂盒是夹心酶免疫测定法，用于体外定量测量猪血清，血浆，组织匀浆，细胞裂解物，细胞培养上清液和其他生物体液中的TRY。  

作为Reddot Biotech全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Reddot Biotech热销产品猪胰蛋白酶 (TRY) ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

猪胰蛋白酶 (TRY) ELISA试剂盒：

样本采集和存储： 

血清-使用血清分离管，让样品在室温下凝结2小时或在4°C过夜，然后以约1000×g离心20分钟。立即测定新鲜制备的血清或将样品等分保存在-20°C或-80°C以备后用。避免反复冻融循环。  

血浆-使用EDTA或肝素作为抗凝剂收集血浆。收集后30分钟内，在2-8°C下以1000×g离心样品15分钟。立即取出血浆并进行检测，或将样品等分保存在-20°C或-80°C以备后用。避免反复冻融循环。 

组织匀浆-组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。对于该测定，应在冰冷的PBS（0.01mol/L，pH7.0-7.2）中冲洗组织以彻底除去过量的血液并在均质化之前称重。将组织切成小块，并在冰上用玻璃匀浆器在5-10ml PBS中将其匀浆（Micro Tissue Grinders也起作用）。所得悬浮液应用超声波细胞破碎器超声处理或进行2次冷冻/解冻循环以进一步破坏细胞膜。然后，以5000×g离心匀浆5分钟。取出上清液并立即测定或等分并储存在≤-20°C。   

细胞裂解物-在根据以下方向进行测定之前，必须裂解细胞。

• 贴壁细胞应与胰蛋白酶分离，然后离心收集（悬浮细胞可直接离心收集）。

• 在冷PBS中洗涤细胞3次。

• 将细胞重悬于PBS（1×）中并使细胞超声处理4次（或在≤-20℃冷冻细胞。轻轻混合解冻细胞。重复冷冻/解冻循环3次）。

• 在2-8℃下以1500×g离心10分钟以除去细胞碎片。

• 细胞培养上清液和其他生物液体-以1000×g离心样品20分钟。立即去除颗粒并进行分析，或将样品等分保存在-20°C或-80°C。避免反复冻融循环。

注意：

• 5天内使用的样品可以储存在4°C，否则样品必须储存在-20°C（≤1个月）或-80°C（≤2个月），以避免生物活性和/或污染。

• 明显的溶血会影响抗体-抗原反应。具有任何溶血迹象的样品不可用于该测定。

• 进行测定时，将样品置于室温。

猪胰蛋白酶 (TRY) ELISA试剂盒试剂制备：

• 使用前将所有试剂盒组分和样品置于室温（18-25°C）。

• 标准品-用1.0 mL标准稀释剂重新配制标准品，在室温下保持10分钟，轻轻摇动（不要泡沫）。 储备溶液中标准品的浓度为100ng/mL。准备7个含有0.5 mL标准稀释剂的试管，并根据下图所示使用稀释的标准品生产双稀释系列。在下一次转移之前彻底混合每个管。准备7分的稀释系列；例如：100 ng/mL，50 ng/mL，25 ng/mL，12.5 ng/mL，6.25 ng/mL，3.125 ng/mL，1.562 ng/mL，最后一个带有标准稀释剂的EP管为空白0 ng/mL。

• 检测溶液A和检测溶液B-检测溶液A和B已经处于正确的浓度，不需要进一步稀释。

• 洗涤液-用580 mL去离子水或蒸馏水稀释20 mL洗涤液浓缩液（30×）以制备600 mL洗涤液（1×）。

• TMB底物-用无菌吸头吸取所需剂量的溶液。不要将残留的溶液倾倒回小瓶中。

注意：

• 不要直接在孔中进行连续稀释。

• 在进行测定后15分钟内准备标准品。

• 按照说明小心重构标准品，避免起泡并轻轻混合直至晶体完全溶解

• 重组标准只能使用一次。

• 如果在洗涤液浓缩液（30×）中形成晶体，则温热至室温并轻轻混合直至晶体完全溶解。

• 试剂制备过程中使用的任何污染水或容器都会影响检测结果。

Reddot Biotech是由一支拥有35年医疗管理经验团队创办的加拿大本土品牌，其已在ELISA产品线上深耕7个年头，并且仍在不断前进中。产品的质量保证也让其越来越多被“收纳进”文献当中，产品线包括ELISA试剂盒、抗体、少量生化试剂，其中ELISA试剂盒超过6000+，物种类型较多：人；大鼠；小鼠；犬科类；牛科；鱼；鸡；猪；兔；山羊；绵羊；猿；马；豚鼠等，像激素类指标促卵泡素（FSH）、促黄体激素（LH），新冠相关病毒受体ACE2、ACE以及肿瘤免疫相关的指标精氨酸酶（ARG）等已是热门应用指标。