trFluor 链霉亲和素——适用于TR-FRET的荧光染料

       时间分辨荧光：

       理论上，荧光是最灵敏的检测手段，由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此，很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。而现在偏振，淬灭，时间关联，荧光寿命改变以及荧光共振能量转移（FRET）已经被广泛应用在对分子间作用的研究中。

       在生物溶液或血清中的很多化合物和蛋白质是自发荧光的，利用传统的快速荧光基团进行检测极大的限制了实验灵敏度。使用长寿命的荧光基团结合时间分辨的检测方式（在荧光激发和发射检测之间有一个时间延迟）可将快速荧光的干扰降到最低。

       时间分辨荧光（TRF）利用稀土元素中镧系元素的独特性质。再TRF中常用的镧系元素是钐（Sm）、铕（Eu）、铽（Tb）、镝（Dy）。与传统荧光基团相比，他们具有大的斯托克位移，和非常长的发射半衰期（从微妙到毫秒），这使它们在生物学荧光应用领域中日益重要。

       通过直接激发使镧系元素离子产生荧光是不容易的，因为这些离子很难吸收光子，镧系元素必须首先与有机分子形成复合物，有机分子收集光子并通过分子内非放射性过程转移到镧系元素上。稀土元素螯合物和穴状配合物是能量收集装置的典型代表，他们收集能量并转移到镧系元素离子上，后者则发出其特征性的长寿命荧光。

       为了能够成功应用于生物学检测中，稀土元素复合物应该具有特定的性质，包括稳定性。较高的发射光产率，并且能够与生物分子进行连接。除此之外，当直接在生物溶液中进行反应时，能够耐受荧光淬灭就显得尤为重要。稀土元素螯合物稳定性较差，而且有的化合物可竞争螯合物活性基团，当与FRET技术结合在一起时其灵敏度也会收到限制。如果稀土元素与穴状物结合，许多限制因素都可去除。

        荧光共振能量转移（FRET）：

       荧光共振能量转移是指在两个不同的荧光基团中，如果一个荧光基团(供体 Donor)的发射光谱与另一个基团(受体 Acceptor)的吸收光谱有一定的重叠，当这两个荧光基团间的距离合适时(一般小于100Å)，就可观察到荧光能量由供体向受体转移的现象，即以前一种基团的激发波长激发时，可观察到后一个基团发射的荧光。

       在荧光共振能量转移中，受体发射荧光的寿命等同于供体的发射荧光的寿命。因为Eu的荧光衰减周期较长，所以含Eu的供体会诱导XL665受体长时间地发射荧光，受体激发后产生的荧光便能持续较长时间，这样通过时间分辨就可以区分那些短寿命的自身散射的荧光，这样从短寿命荧光背景中就很容易区分出FRET信号。

       当由于生物分子相互作用导致两个荧光基团接近时，在激发时被穴状化合物捕获的部分能量释放，发射波长为620nm；另一部分能量转移到受体（acceptor）上，发射波长为 665nm。665nm的发射光仅仅由供体（donor）引起的FRET产生。所以，当生物分子相互作用时，有两个激发光620nm和 665nm；当不存在相互作用时，只有620nm一个激发光。

       艾美捷科技为您推荐AAT Bioquest的 trFluor 链霉亲和素缀合物，这种缀合物通常与生物素化的二抗结合使用，可作为间接免疫荧光染色的第二检测试剂。同时它们是利用TR-FRET平台进行生物素-链霉亲和素的生物学测定非常有价值的工具，trFluor 链霉亲和素偶联物由trFluor和链霉亲和素组成，trFluor Eu或trFluor Tb共价附有时间分辨的红色荧光euro（Eu）标记或绿色荧光ter（Tb）标记。

         trFluor 染料的主要特点：

       1.无需添加氟化物或增强溶液。

       2.适用于多种反应形式。

       3.比其他TRF染料更容易与生物分子偶联，具有更高的偶联产率。

       4.在?350 nm处被普通光源最大程度地激发。

       使用trFluor 标记的链霉亲和素偶联物进行TR-FRET测定原理

        时间分辨发光探针的典型受体：

       美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

       作为AAT Bioquest Inc.的中国区域代理，艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品，同时更为您售前售后全面技术支持。