DNA断裂是细胞凋亡的重要特征,在凋亡初期,DNA可断裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段;晚期则可进一步在核小体间断裂,形成180-200bp的DNA断裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记法)可以检测到任何形式的DNA断裂,业已成为检测细胞凋亡的常用方法,其结果可用光学显微镜或流式细胞仪进行分析。
TUNEL法即是利用外源性的TdT酶(Terminal deoxynucleotidy transferase,末端脱氧核苷酸转移酶),将标记的底物dUTP或BrdU(无或有荧光标记)加到DNA的断点上,从而实现对DNA断点的标记,然后用酶法(如HRP-抗dUTP抗体)或荧光法(如BrdU-FITC)来检测结果,以显示凋亡时DNA断裂的程度。艾美捷向您推荐享誉全球的Trevigen TUNEL全系列解决方案。这些方案包括,基于BrdU渗入并检测原理的TACS® XL原位凋亡检测方案,基于TdT酶将生物素Biotin标记dUTP渗入并标记的TACS® 2 TdT TUNEL检测方案,专门针对不同组织(如神经/肿瘤/心肌/血管/皮肤等)样本的TUNEL检测方案,另外还有分别适用于微孔板检测和流式细胞术检测的TUNEL方案等。
其中Trevigen独特的TACS® XL系列产品为原位检测凋亡提供更优的检测方案,基于BrdU渗入并检测的原理,即BrdU能与凋亡中形成的DNA片段的3’OH末端结合。与传统的TUNEL法中使用生物素或地高辛标记核酸的技术相比,TACS® XL则使用BrdU与TdT结合再通过免疫技术特异性的检测BrdU的量。检测系统内使用Biotin标记的抗BrdU抗体和HRP标记的链亲和素。特异抗体与具有信号放大功能的生物素亲和素系统结合,使其在竞争性测试中观察到精确的细胞标记,同时获得最高的信噪比。Trevigen TACS® XL试剂盒形式,均可进行30次分析,其区别在于不同的检测底物和组分。如TACS® XL DAB Kit提供了包括DAB、甲基绿复染以及BrdU抗体和链亲和素等TACS XL的TUNEL分析所需的所有必需组份;而TACS® XL Basic Kit仅提供了基本的组分,而不含DAB、甲基绿复染试剂、产生对照的TACS Nuclease等组分;TACS® XL Blue Label Kit提供了基于TACS蓝色标记、细胞核快红复染的所有必需组分;除了这些完整的试剂盒,艾美捷还想您推荐单独的组分。
艾美捷向您推荐的基于BrdU的TACS XL®原位凋亡检测方案具有如下的优点:1、高信噪比,信号强,背景低;2、对蛋白酶引起的假阳性标记不敏感,对地高辛或生物素敏感的试剂盒;3、提供DAB或TACS Blue标记选择的全面试剂盒;4、包含独一无二的Cytonin通透化试剂;5、包含TACS-核酶质控试剂;6.易于进行荧光读数。相关产品如下:
品名 | 品牌 | 货号 | 产品说明 |
TACS®XL Antibody Module | Trevigen | 4828-30-AC | 30次样本分析 |
Blue Label Detection Module | Trevigen | 4828-30-BC | 30次样本分析 |
TACS® XL Blue Label Kit | Trevigen | 4828-30-BK | 30次样本分析 |
DAB (diaminobenzidine) Detection Module | Trevigen | 4828-30-DC | 30次样本分析 |
TACS® XL DAB (diaminobenzidine) Kit | Trevigen | 4828-30-DK | 30次样本分析 |
TACS® XL Basic Kit | Trevigen | 4828-30-K | 30次样本分析 |
Nuclease Module | Trevigen | 4828-30-N | 30次样本分析 |
TACS® XL Replenisher Kit | Trevigen | 4828-30-R | 30次样本分析 |
艾美捷向您提供一站式的TUNEL全系列解决方案。这些方案包括,基于BrdU渗入并检测原理的TACS® XL三种原位凋亡检测方案、基于TdT酶将生物素Biotin标记dUTP渗入并标记的三种TACS® 2 TdT TUNEL检测方案、专门针对不同组织(如神经/肿瘤/心肌/血管/皮肤等)不同组织样本的TUNEL检测方案、另外还有分别适用于微孔板检测和流式细胞术检测的TUNEL方案等。
Trevigen是一家快速成长的美国生物技术公司,专注于细胞凋亡、DNA损伤和修复、肿瘤细胞功能与行为等方面研究的肿瘤研究产品和服务。作为 Trevigen在中国区域的总代理,艾美捷与Trevigen一道为中国的科研工作者提供最好、最新的氧化应激、细胞损伤和肿瘤细胞行为研究等领域内的 优质产品和技术服务。文章来源:http://www.bio-review.com/tacs-xl-tunel-assay/
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