如何利用多色流式细胞术筛选活化T淋巴细胞

       T淋巴细胞是一种重要的免疫活性细胞，由一群功能不同的异质性淋巴细胞组成，在胸腺内分化成熟，在整个免疫应答中处于中心环节。在T细胞发育不同阶段，其细胞膜分子表达的种类和数量均不相同。譬如，初始T细胞胞体小，细胞质少，表达CD45RA、CCR7、CD62L、CD127和CD132等，但不表达一些活化相关的标志物，例如CD25（晚期）、CD44、CD69、CD45RO或HLA-DR（较晚期）。因此T淋巴细胞在活化的不同阶段细胞表面会表达不同的活化分子，它们是检测T淋巴细胞是否被有效诱导活化的标准。

      1、细胞毒T细胞（cytotoxic T cell）：消灭受感染的细胞。这些细胞的功能就像一个“杀手”或细胞毒素，因为它们可以对产生特殊抗原反应的目标细胞进行杀灭。细胞毒T细胞的主要表面标志是CD8，也被称为杀手T细胞。

      2、辅助T细胞（helper T cell）在免疫反应中扮演中间过程的角色：它可以增生扩散来激活其它类型的产生直接免疫反应的免疫细胞。辅助T细胞的主要表面标志是CD4。 T细胞调控或“辅助”其它淋巴细胞发挥功能。

      3、调节/抑制T细胞（regulatory/suppressor T cell）：负责调节机体免疫反应。通常起着维持自身耐受和避免免疫反应过度损伤机体的重要作用。调节/抑制T细胞有很多种，目前研究最活跃的是CD25+ CD4+ T细胞。

      4、记忆T细胞 (memory T cell)：在再次免疫应答中起重要作用。记忆T细胞由于暂时没有非常特异的表面标志。

      由此可知，T细胞及其亚群可以根据细胞表面表达的不同标志物而区分，如CD3，CD4，CD8和CD25等。使用这些结合了荧光的抗体直接标记这些标志物之后，多色流式分析技术就可以帮助研究者对单个细胞同时进行多个标志物的测量，而这可以提供特定样品关于细胞系以及细胞亚群分化阶段的信息。

      流式细胞术研究专家exbio可提供活性T细胞筛选试剂盒，助您实现活性T细胞的免疫分型。

      试剂盒中抗体信息：

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      结果分析——新冠病毒患者外周血样本分析：

      COVID-19患者中免疫细胞频率动力学的事例。

      上图设门分析用于鉴定患者外周血中活化的细胞毒性CD8 + T淋巴细胞。下图显示了患者住院期间几个时间点测得的细胞频率（占T细胞的百分比）。

      流式细胞术表型分析策略，用于鉴定正常人外周血中活化的T细胞。

      1.单重态细胞

      2.白细胞

      3.淋巴细胞

      4.CD3 + T淋巴细胞

      5.CD4 +与CD8 + T淋巴细胞

      下中部：活化的CD8 +细胞毒性T淋巴细胞

      右下：循环的滤泡辅助性T淋巴细胞

      右上：激活的CD4 +辅助/诱导T淋巴细胞

      COVID-19患者中免疫细胞频率动力学的示例。

      上图设门分析用于鉴定患者外周血中活化的辅助/诱导剂CD4 + T淋巴细胞。

      下图显示了患者住院期间几个时间点测得的细胞频率（占T细胞的百分比）。

      需要住院的COVID-19患者中免疫细胞频率动力学的示例。

      上图显示了用于识别患者外周血中循环性T辅助滤泡细胞的设门策略。

      下图显示了患者住院期间几个时间点测得的细胞频率（占T细胞的百分比）。

      使用ED7705 活性T细胞筛选试剂盒在正常人外周血中对活化的细胞毒性CD8 + T淋巴细胞（左），活化的辅助/诱导性CD4 + T淋巴细胞（中）和循环T辅助滤泡细胞（右）进行流式细胞仪表面染色。 图显示了每种细胞亚群的频率（占T细胞的百分比）。

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