Synaptic Systems常见问题&FAQs
Synaptic Systems(SySy)品牌成立于德国,专注于研发和生产针对突触和神经科学相关抗体,以及用于细胞生物学、组织病理学和高分辨率显微镜的各种抗体,除此之外,还推出与SySy抗体配套使用的试剂盒、试剂等产品组合,全方面满足客户的各种需求。抗体产品线主要有:突触活性区域相关抗体、突触后蛋白相关抗体、RNA修饰如m6A抗体、突触粘附蛋白抗体、SNARE相关抗体、Alzheimer's相关抗体、细胞骨架、离子通道相关抗体等。
那么接下来为各位同学整理出常见问题,希望这能帮到您。(重组以及储存)
1. 我应该如何重组抗体?
我们所有纯化的抗体都是从PBS中冻干的。
所以这也就解释了为什么好多同学疑问:我加了水以后到底是PBS溶液,还是正常溶液。
①为了在PBS中重组抗体,加入说明书中给出的去离子水的量。
所有的抗体都是在PBS中冻干,加了水,也就变成了PBS溶液,加水复溶到对应浓度即可,然后分装保存避免反复冻融~
如果需要更大的体积,按上述方法加水,然后加入所需量的PBS和稳定载体蛋白(如BSA)至最终浓度为2%。
注:由于一些抗体已经含有白蛋白。在添加更多的载体蛋白时要考虑到这一点。
②如果需要,添加少量叠氮化物或硫柳汞,以防止微生物生长。如果你想保持4°C的温度储存,特别建议这样做!
③重组荧光标记抗体后,加入1:1 (v/v)的甘油至终浓度为50%。这降低了你的抗体的凝固点,使你的抗体在-20°C时保持液态。
注:甘油也可以添加到未标记的一抗中。这是一种避免冻融循环的合适方法。
2. 我应该如何储存抗体?
收到抗体时:
我们所有的抗体和对照蛋白/肽都是冻干(真空冷冻干燥)粉末运输的,在环境温度下保持稳定,几周内不会损失质量。
①未标记和生物素标记的抗体和对照蛋白在重组前应保存在4°C。当它们还在冻干状态时,千万不要储存在冰箱里! 温度低于0°C可能会导致性能下降。
②收到荧光标记抗体后应立即重组。长期储存(几个月)可能导致聚集。
③对照肽重组前,应保存在-20°C。
重组后的长期储存(一般考虑)
①储存冷冻室不能是无霜(“无霜冷冻室”):这种冻结和解冻之间的循环(以减少结霜),正是应该避免的。出于同样的原因,抗体小瓶应放在冷冻室温度波动最小的区域,例如靠后而不是放在门架上。
②将抗体等分,并冷冻保存(-20°C至-80°C):避免非常小的等分(低于20ul),并使用尽可能小的储存瓶或管。等分越小,抗体在储存瓶或管表面的蒸发和吸附对储存液浓度的影响越大。
注:抗体在表面的吸附会导致活性的大量丧失。
③将甘油添加到最终浓度为50%时,并将抗体保持在-20°C的液态。这有效地避免了冻结和解冻循环。
产品存储的具体提示
Control proteins / peptides
储存于-20°C~ -80°C
Monoclonal Antibodies
Ascites和hybridoma supernatant应保存在-20°C ~ -80°C。
不建议在4°C下长时间储存! 与血清不同,腹水可能含有蛋白酶,可降解抗体。
Purified IgG应保存在-20°C~ -80°C。添加像BSA这样的载体蛋白会增加长期稳定性。我们的许多抗体已经含有载体蛋白。详细资料请参阅数据表。
Polyclonal Antibodies
Crude antisera:添加抗微生物药物后,可在4℃保存。 然而,最佳储存(-20°C ~ -80°C)。
Affinity purified antibodies
不如抗血清稳定。建议在-20°C ~ -80°C下保存。添加像BSA这样的载体蛋白会增加长期稳定性。我们的大多数抗体已经含有载体蛋白。详细资料请参阅数据表。
Fluorescence-labeled Antibodies
用1:1 (v/v)甘油,在-20°C下保存。保护这些抗体免受光照。
重点:避免所有抗体重复冻融循环!
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