蛋白质中的赖氨酸乙酰化修饰调控蛋白质的多种性质,包括DNA-蛋白质相互作用、亚细胞定位、转录活性、蛋白质稳定性等等。除了这些重要的生物学功能外,赖氨酸乙酰化蛋白质及其调控酶与衰老和几种重大疾病(如癌症、神经变形紊乱、心血管疾病等)紧密相联。
组蛋白去乙酰化酶主要分为如下四类:
Class I HDACs:HDAC1, 2, 3, 8
Class II HDACs: HDAC4, 5, 6, 7, 9, 10
Class III HDAC:即为sirtuins(SIRTs), NAD+依赖的去乙酰化酶,包含SIRTs 1-7
Class IV HDAC:HDAC11
而今天的主角就是SIRTs。SIRT蛋白家族是生物体内一类依赖于NAD+、核心区域高度保守的蛋白去乙酰化酶和ADP核糖基转移酶,通过调节蛋白的乙酰化/去乙酰化修饰发挥调控相关蛋白活性和基因表达的作用。SIRT蛋白家族可以分为7个不同的亚型并且在细胞中的定位不同,SIRT1、SIRT6和SIRT7主要位于细胞核内,SIRT3、SIRT4和SIRT5主要定位在线粒体中,同时,SIRT3也部分表达在细胞核中,而SIRT2主要分布在细胞浆中。哺乳动物SIRT蛋白家族可与P53、FOXO、PGC-1α、NF-κB、Ku70等蛋白相互作用,调控细胞应激反应,进而影响细胞代谢、衰老和凋亡等生物学进程。
《SIRTs家族蛋白成员列表》
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产品名称及描述 | 货号 | 产品说明 |
SIRT Activity/Inhibition Assay Kit(比色法) | P-4036 | 详情 |
SIRT Activity/Inhibition Assay Kit(荧光法) | P-4037 | 详情 |
SIRT活性/抑制检测试剂盒原理:
Epigenase 通用SIRT活性/抑制分析试剂盒(比色法)包含所有必要试剂,用来检测SIRT活性/抑制,在实验里,乙酰化的组蛋白SIRT底物稳定的包被在微孔板内,激活的SIRTs绑定底物转移乙酰基团,SIRT去乙酰化产物被特异抗体所识别。比率或者大量去乙酰化产物被酶标仪在450nm处检测结果。SIRT酶活性与测得光密度值成比例。
SIRT活性/抑制检测试剂盒优势:
【全覆盖的适用种属】:哺乳动物(细胞,组织),植物,真菌,细菌等
1、微孔板形式更灵活快速,既能适用于手工又能适用于高通量分析,实验需要3.5小时;
2、本试剂盒实验结果更精确,灵敏,可靠,可靠并能显著降低背景信号;
3、创新性比色法能方便的直接检测SIRT转换的去甲基化产品来测定SIRT活性/抑制,相对基于胰蛋白酶切割肽段原理,抗干扰能力更强;
4、无论细胞/组织还是纯化的SIRT酶都适用于本试剂盒,还能在体内或者体外测定SIRT抑制剂的功效;
5、尼克酰胺是SIRT抑制剂做为本试剂盒阳性对照,还含有曲古抑菌素A,作为HDACI/II的抑制剂来阻断HDAC活性;
6、新型实验能获得更高的灵敏度,对于纯化的SIRT酶最低检测极限为1ng,其灵敏度为依赖胰蛋白酶肽段切割实验的10倍.
结果展示:
产品说明书:
比色法:https://www.epigentek.com/docs/P-4036.pdf
荧光法:https://www.epigentek.com/docs/P-4037.pdf
《已发表文章》
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Kumar P al.(June 2014). All-trans retinoic acid and sodium butyrate enhance natriuretic peptide receptor a gene transcription: role of histone modification.Mol Pharmacol. 85(6):946-57.
Shimada T al.(April 2014). Des-acyl ghrelin protects microvascular endothelial cells from oxidative stress-induced apoptosis through sirtuin 1 signaling pathway.Metabolism. 63(4):469-74.
Hishida T al.(August 2012). Sirt1, p53, and p38(MAPK) are crucial regulators of detrimental phenotypes of embryonic stem cells with Max expression ablation.Stem Cells. 30(8):1634-44.
Ma L al.(October 2014). SIRT1 and SIRT2 inhibition impairs pediatric soft tissue sarcoma growth.Cell Death Dis. 5:e1483.
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