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全套ROS 选择攻略,总有一款适合你

发布者:艾美捷科技    发布时间:2021-07-28     
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活性氧(ROS)是生物有氧代谢过程中的副产品,包括氧离子,过氧化物和含氧自由基等。今天给大家整理了一批活性氧检测工具,有同时检测总的活性氧成分和单独检测某一种成分的试剂盒和探针,一起来瞧瞧吧,总有一款适合你的。

 

首先给大家介绍一款检测总ROS检测工具,总ROS检测试剂/试剂盒可以检测活细胞中总的ROS,它与ROS反应时,会产生荧光,这款试剂盒有多种规格、颜色,可适用于多种仪器:

产品名称货号规格Ex/Em(nm)适用仪器
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒22900200 Tests492/520荧光显微镜/荧光酶标仪
22901200 Tests520/605荧光显微镜/荧光酶标仪
22903200 Tests658/675荧光显微镜/流式细胞仪
22904100 Tests490/520流式细胞仪
探针160501 mg498/517 
160511 mg498/517 
160531 mg560/575 

 

检测HeLa细胞中的ROS.jpg

图1. 用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒(货号:22900)检测HeLa细胞中的ROS。将HeLa细胞以15,000个细胞/ 90 uL /孔在Costar黑色/透明底部96孔板中过夜接种。将细胞未经处理(对照)或在37°C下用1 mM H2O2或100 uM叔丁基氢过氧化物(TBHP)处理30分钟。加入ROS Brite 670工作溶液(100 uL /孔),并在5%CO2和37°C的培养箱中孵育1小时。使用FlexStation(Molecular Devices)以底部读取模式在Ex / Em = 650/675 nm(cut off= 665 nm)处检测荧光信号。

用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色的Hela细胞图像.jpg

图2. 在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色的Hela细胞图像。A:未经处理的对照细胞。 B:细胞在染色前用100 uM氢过氧化叔丁基(TBHP)处理30分钟。

ROS Brite 700对PBS缓冲液(pH 7.2)中不同活性氧的荧光响应.jpg

图3. ROS Brite 700对PBS缓冲液(pH 7.2)中不同活性氧的荧光响应。用Ex / Em = 670 / 700nm测量荧光强度。

 

各种探针可检测的活性氧种类

活性氧种类ROS Brite 570ROS Brite 670ROS Brite 700ROS Brite HDCFAmplite ROS GreenAmplite ROS Red
H2O2++++++++++++
.OH+++++++++
TBHP(叔丁基过氧化氢)++++++
HOCl(次氯酸)-+++-+-
O2-(超氧阴离子)+++++---
NO------
ONOO-过氧亚硝酸------
货号22902229031600416053

22900

22904

22901

 

过氧化氢(H2O2)检测

 货号规格Ex/Em(nm)适用仪器适用样本
Amplite 荧光法过氧化氢检测试剂盒11502500 Tests648/668荧光酶标仪细胞裂解液
11501500 Tests571/584荧光酶标仪细胞裂解液
Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒11503200 Tests498/517荧光酶标仪/荧光显微镜细胞
11504100 Tests405/450荧光显微镜细胞
11505100 Tests405/450流式细胞仪细胞
11506100 Tests498/517流式细胞仪细胞
探针1520425 mg505/526 细胞
1520610 mg507/529 细胞
1520325 mg498/517 细胞

 

DA 与 YEMPS 肽的共育增强 H2O2生产.jpg

图1. H2O2浓度由DA单独产生,并具有来自C-syn α 15分钟(浅灰色)、30分钟(深灰色)和60分钟(黑色)的C-终端序列中的各种肽。DA 本身(无肽)随着时间的推移产生越来越多的 H2O2。DA 与 YEMPS 肽的共育增强 H2O2生产,而缺乏肽的 Y127-(EMPSEEGY)和 S129-(NEAYEMP)比 DA 单独或使用 YEMPS 肽产生的 H2O2较少。此外,DA与海氨酸突变肽(YEAPS)的联育在所有条件下产生最高量的H2O2

Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒.jpg

图2. 使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(货号:11503)在HeLa细胞中细胞内过氧化氢的荧光图像。在37℃下用(左)或不用(右)100 uM过氧化氢处理HeLa细胞90分钟。

Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒.jpg

图3. 使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(货号:11506)检测Jurkat细胞中的过氧化氢。将Jurkat细胞用OxiVision Green过氧化物探针染色30分钟,并在37°C下用100 uM过氧化氢处理90分钟。用OxiVision绿色过氧化物探针染色但未进行过氧化氢处理的细胞用作对照。

 

过氧化物酶类检测

名称货号规格Ex/Em(nm)仪器适用样本
Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒11306200 Tests571/584荧光酶标仪细胞裂解液
11552500 Tests571/584
11553500 Tests648/668
Amplite 荧光法MPO检测试剂盒11301200 Tests571/584
ReadiUse 哺乳动物细胞裂解液2001210 ml/  

 

超氧阴离子(O2·-)

名称货号规格Ex/Em(nm)适用仪器适用样本
二氢乙锭1520025 mg500/582流式细胞仪细胞

 

超氧化物歧化酶(SOD)

产品名称货号规格适用仪器适用样本
Amplite 比色法超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒11305200 Tests酶标仪细胞裂解液

 

线粒体内活性氧

活性氧种类产品名称货号Ex/Em(nm)规格适用仪器适用样本
羟基自由基(·OH)Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒16055540/590200 Tests荧光显微镜细胞
超氧自由基(O2·-)Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒16060488/530200 Tests酶标仪/流式细胞仪细胞
22970540/590100 Tests流式细胞仪细胞
22971540/590200 Tests酶标仪细胞

 

MitoROS OH580.jpg

图1.使用MitoROS OH580(Cat#16055)在HeLa细胞中检测羟基自由基的荧光图像。将HeLa细胞与MitoROS OH580工作溶液在37°C下孵育1小时,然后用HHBS洗涤一次。 Fenton反应:然后在37°C的1X HBSS缓冲液中,用10 uM CuCl2和100 uM H2O2处理细胞1小时。对照:HeLa细胞未经处理即可保存在1X HBSS缓冲液中。用HHBS洗涤3次后,使用带有TRITC滤光片组(红色)的荧光显微镜测量HeLa细胞。细胞核用Hoechst 33342(Cat#17530,蓝色)染色。

Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色.jpg

图2.在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色的Hela细胞图像。A:未经处理的对照细胞。 B:细胞在染色前用100 uM氢过氧化叔丁基(TBHP)处理30分钟。

Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒检测Jurkat细胞中的细胞内超氧化物.png

图3.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒检测Jurkat细胞中的细胞内超氧化物。 AMA处理(红色):将细胞在37°C下用50 uM抗霉素A(AMA)处理30分钟,然后与MitoROS 580孵育1小时。对照(蓝色):在未经AMA处理的情况下,将细胞与MitoROS 580在37°C孵育1小时。使用流式细胞仪(BD FACSCalibur)在FL2通道上监测荧光信号。

 

次氯酸阴离子(ClO-)

产品名称货号Ex/Em(nm)规格适用仪器适用样本
Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒13845/200 Tests酶标仪细胞裂解液
Amplite 荧光法次氯酸检测试剂盒13846555/576200 Tests荧光酶标仪细胞裂解液

 

谷胱甘肽GSH

产品名称货号Ex/Em(nm)规格适用仪器适用样本
Amplite 荧光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率检测试剂盒10056510/524200 Tests荧光酶标仪细胞裂解液
Amplite 荧光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率快速检测试剂盒10060510/524200 Tests荧光酶标仪细胞裂解液
Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒22809415/499100 Tests流式细胞仪细胞
22810510/525100 Tests流式细胞仪细胞

 

一氧化氮(NO)与过氧亚硝酸(ONOO-)

 产品名称货号Ex/Em(nm)规格适用仪器适用样本
一氧化氮(NO)Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒16350552/575200 Tests荧光酶标仪/荧光显微镜细胞
16351552/575100 Tests流式细胞仪细胞
16356586/607100 Tests流式细胞仪细胞
16359650/680200 Tests荧光显微镜/酶标仪细胞
16360650/680100 Tests流式细胞仪细胞
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J2  红16301587/6091 mg 细胞
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J2 橙16300552/5751 mg 细胞
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J216302778/7921 mg 细胞
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J216310404/4681 mg 细胞
亚硝酸盐(ONOO-)Amplite 荧光法过亚硝酸盐定量检测试剂盒16316502/535100 Tests荧光酶标仪细胞裂解液
Cell Meter 荧光法细胞内过亚硝酸盐检测试剂盒16315502/535100 Tests荧光酶标仪/荧光显微镜细胞
Cell Meter 荧光法细胞内过亚硝酸盐检测试剂盒16317502/535100 Tests流式细胞仪细胞

 

脂质过氧化(MDA)

产品名称货号Ex/Em(nm)规格适用仪器适用样本
Amplite 比色法丙二醛(MDA)定量试剂盒10070695200 Tests酶标仪细胞裂解液
Amplite 荧光法法丙二醛(MDA)定量试剂盒10071365/435200 Tests荧光酶标仪细胞裂解液

  

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