活性氧(ROS)是生物有氧代谢过程中的副产品,包括氧离子,过氧化物和含氧自由基等。今天给大家整理了一批活性氧检测工具,有同时检测总的活性氧成分和单独检测某一种成分的试剂盒和探针,一起来瞧瞧吧,总有一款适合你的。
首先给大家介绍一款检测总ROS检测工具,总ROS检测试剂/试剂盒可以检测活细胞中总的ROS,它与ROS反应时,会产生荧光,这款试剂盒有多种规格、颜色,可适用于多种仪器:
产品名称 | 货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 适用仪器 |
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 | 22900 | 200 Tests | 492/520 | 荧光显微镜/荧光酶标仪 |
22901 | 200 Tests | 520/605 | 荧光显微镜/荧光酶标仪 | |
22903 | 200 Tests | 658/675 | 荧光显微镜/流式细胞仪 | |
22904 | 100 Tests | 490/520 | 流式细胞仪 | |
探针 | 16050 | 1 mg | 498/517 | |
16051 | 1 mg | 498/517 | ||
16053 | 1 mg | 560/575 |
图1. 用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒(货号:22900)检测HeLa细胞中的ROS。将HeLa细胞以15,000个细胞/ 90 uL /孔在Costar黑色/透明底部96孔板中过夜接种。将细胞未经处理(对照)或在37°C下用1 mM H2O2或100 uM叔丁基氢过氧化物(TBHP)处理30分钟。加入ROS Brite 670工作溶液(100 uL /孔),并在5%CO2和37°C的培养箱中孵育1小时。使用FlexStation(Molecular Devices)以底部读取模式在Ex / Em = 650/675 nm(cut off= 665 nm)处检测荧光信号。 |
图2. 在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色的Hela细胞图像。A:未经处理的对照细胞。 B:细胞在染色前用100 uM氢过氧化叔丁基(TBHP)处理30分钟。 |
图3. ROS Brite 700对PBS缓冲液(pH 7.2)中不同活性氧的荧光响应。用Ex / Em = 670 / 700nm测量荧光强度。 |
各种探针可检测的活性氧种类:
活性氧种类 | ROS Brite 570 | ROS Brite 670 | ROS Brite 700 | ROS Brite HDCF | Amplite ROS Green | Amplite ROS Red |
H2O2 | + | + | + | +++ | +++ | +++ |
.OH | ++ | ++ | ++ | + | + | + |
TBHP(叔丁基过氧化氢) | + | + | + | + | + | + |
HOCl(次氯酸) | - | + | ++ | - | + | - |
O2-(超氧阴离子) | + | ++ | ++ | - | - | - |
NO | - | - | - | - | - | - |
ONOO-(过氧亚硝酸) | - | - | - | - | - | - |
货号 | 22902 | 22903 | 16004 | 16053 | 22900 22904 | 22901 |
过氧化氢(H2O2)检测:
货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 适用仪器 | 适用样本 | |
Amplite 荧光法过氧化氢检测试剂盒 | 11502 | 500 Tests | 648/668 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
11501 | 500 Tests | 571/584 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 | |
Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 | 11503 | 200 Tests | 498/517 | 荧光酶标仪/荧光显微镜 | 细胞 |
11504 | 100 Tests | 405/450 | 荧光显微镜 | 细胞 | |
11505 | 100 Tests | 405/450 | 流式细胞仪 | 细胞 | |
11506 | 100 Tests | 498/517 | 流式细胞仪 | 细胞 | |
探针 | 15204 | 25 mg | 505/526 | 细胞 | |
15206 | 10 mg | 507/529 | 细胞 | ||
15203 | 25 mg | 498/517 | 细胞 |
图1. H2O2浓度由DA单独产生,并具有来自C-syn α 15分钟(浅灰色)、30分钟(深灰色)和60分钟(黑色)的C-终端序列中的各种肽。DA 本身(无肽)随着时间的推移产生越来越多的 H2O2。DA 与 YEMPS 肽的共育增强 H2O2生产,而缺乏肽的 Y127-(EMPSEEGY)和 S129-(NEAYEMP)比 DA 单独或使用 YEMPS 肽产生的 H2O2较少。此外,DA与海氨酸突变肽(YEAPS)的联育在所有条件下产生最高量的H2O2。 |
图2. 使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(货号:11503)在HeLa细胞中细胞内过氧化氢的荧光图像。在37℃下用(左)或不用(右)100 uM过氧化氢处理HeLa细胞90分钟。 |
图3. 使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(货号:11506)检测Jurkat细胞中的过氧化氢。将Jurkat细胞用OxiVision Green过氧化物探针染色30分钟,并在37°C下用100 uM过氧化氢处理90分钟。用OxiVision绿色过氧化物探针染色但未进行过氧化氢处理的细胞用作对照。 |
过氧化物酶类检测:
名称 | 货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 仪器 | 适用样本 |
Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 | 11306 | 200 Tests | 571/584 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
11552 | 500 Tests | 571/584 | |||
11553 | 500 Tests | 648/668 | |||
Amplite 荧光法MPO检测试剂盒 | 11301 | 200 Tests | 571/584 | ||
ReadiUse 哺乳动物细胞裂解液 | 20012 | 10 ml | / |
超氧阴离子(O2·-):
名称 | 货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 适用仪器 | 适用样本 |
二氢乙锭 | 15200 | 25 mg | 500/582 | 流式细胞仪 | 细胞 |
超氧化物歧化酶(SOD):
产品名称 | 货号 | 规格 | 适用仪器 | 适用样本 |
Amplite 比色法超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 | 11305 | 200 Tests | 酶标仪 | 细胞裂解液 |
线粒体内活性氧:
活性氧种类 | 产品名称 | 货号 | Ex/Em(nm) | 规格 | 适用仪器 | 适用样本 |
羟基自由基(·OH) | Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒 | 16055 | 540/590 | 200 Tests | 荧光显微镜 | 细胞 |
超氧自由基(O2·-) | Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒 | 16060 | 488/530 | 200 Tests | 酶标仪/流式细胞仪 | 细胞 |
22970 | 540/590 | 100 Tests | 流式细胞仪 | 细胞 | ||
22971 | 540/590 | 200 Tests | 酶标仪 | 细胞 |
图1.使用MitoROS OH580(Cat#16055)在HeLa细胞中检测羟基自由基的荧光图像。将HeLa细胞与MitoROS OH580工作溶液在37°C下孵育1小时,然后用HHBS洗涤一次。 Fenton反应:然后在37°C的1X HBSS缓冲液中,用10 uM CuCl2和100 uM H2O2处理细胞1小时。对照:HeLa细胞未经处理即可保存在1X HBSS缓冲液中。用HHBS洗涤3次后,使用带有TRITC滤光片组(红色)的荧光显微镜测量HeLa细胞。细胞核用Hoechst 33342(Cat#17530,蓝色)染色。 |
图2.在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色的Hela细胞图像。A:未经处理的对照细胞。 B:细胞在染色前用100 uM氢过氧化叔丁基(TBHP)处理30分钟。 |
图3.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒检测Jurkat细胞中的细胞内超氧化物。 AMA处理(红色):将细胞在37°C下用50 uM抗霉素A(AMA)处理30分钟,然后与MitoROS 580孵育1小时。对照(蓝色):在未经AMA处理的情况下,将细胞与MitoROS 580在37°C孵育1小时。使用流式细胞仪(BD FACSCalibur)在FL2通道上监测荧光信号。 |
次氯酸阴离子(ClO-):
产品名称 | 货号 | Ex/Em(nm) | 规格 | 适用仪器 | 适用样本 |
Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒 | 13845 | / | 200 Tests | 酶标仪 | 细胞裂解液 |
Amplite 荧光法次氯酸检测试剂盒 | 13846 | 555/576 | 200 Tests | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
谷胱甘肽GSH:
产品名称 | 货号 | Ex/Em(nm) | 规格 | 适用仪器 | 适用样本 |
Amplite 荧光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率检测试剂盒 | 10056 | 510/524 | 200 Tests | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
Amplite 荧光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率快速检测试剂盒 | 10060 | 510/524 | 200 Tests | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 | 22809 | 415/499 | 100 Tests | 流式细胞仪 | 细胞 |
22810 | 510/525 | 100 Tests | 流式细胞仪 | 细胞 |
一氧化氮(NO)与过氧亚硝酸(ONOO-):
产品名称 | 货号 | Ex/Em(nm) | 规格 | 适用仪器 | 适用样本 | |
一氧化氮(NO) | Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 | 16350 | 552/575 | 200 Tests | 荧光酶标仪/荧光显微镜 | 细胞 |
16351 | 552/575 | 100 Tests | 流式细胞仪 | 细胞 | ||
16356 | 586/607 | 100 Tests | 流式细胞仪 | 细胞 | ||
16359 | 650/680 | 200 Tests | 荧光显微镜/酶标仪 | 细胞 | ||
16360 | 650/680 | 100 Tests | 流式细胞仪 | 细胞 | ||
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J2 红 | 16301 | 587/609 | 1 mg | 细胞 | ||
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J2 橙 | 16300 | 552/575 | 1 mg | 细胞 | ||
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J2 | 16302 | 778/792 | 1 mg | 细胞 | ||
一氧化氮NO荧光探针 DAX-J2 | 16310 | 404/468 | 1 mg | 细胞 | ||
亚硝酸盐(ONOO-) | Amplite 荧光法过亚硝酸盐定量检测试剂盒 | 16316 | 502/535 | 100 Tests | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
Cell Meter 荧光法细胞内过亚硝酸盐检测试剂盒 | 16315 | 502/535 | 100 Tests | 荧光酶标仪/荧光显微镜 | 细胞 | |
Cell Meter 荧光法细胞内过亚硝酸盐检测试剂盒 | 16317 | 502/535 | 100 Tests | 流式细胞仪 | 细胞 |
脂质过氧化(MDA):
产品名称 | 货号 | Ex/Em(nm) | 规格 | 适用仪器 | 适用样本 |
Amplite 比色法丙二醛(MDA)定量试剂盒 | 10070 | 695 | 200 Tests | 酶标仪 | 细胞裂解液 |
Amplite 荧光法法丙二醛(MDA)定量试剂盒 | 10071 | 365/435 | 200 Tests | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
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