RhoA Pulldown 活化检测试剂盒所需设备和示例结果

发布者：艾美捷科技发布时间：2023-02-13

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Rho开关通过在GTP绑定的活动状态和非活动状态的GDP绑定状态之间交替运行。了解调节GTP酶活化/失活的机制具有明显的生物学意义，并且是深入研究的主题。许多Rho家族效应蛋白将特异性识别蛋白质的GTP结合形式这一事实已被实验利用，以开发一种强大的亲和纯化测定，该测定法监测RhoA蛋白活化。该测定使用Rho效应蛋白Rhotekin的Rho结合域（RBD）。RBD基序已被证明与GTP结合形式的RhoA特异性结合。Rhotekin 的 RBD 区域对 GTP-RhoA 具有高亲和力，并且 Rhotekin 结合导致 GTP 水解的内在和催化速率显着降低，这一事实使其成为从细胞裂解物中亲和纯化 GTP-RhoA 的理想工具。该试剂盒中提供的Rhotekin-RBD蛋白含有Rhotekin残基7-89，并且是GST融合蛋白的形式，它允许人们用色彩鲜艳的谷胱甘肽亲和珠“下拉”Rhotekin-RBD / Rho-GTP复合物。因此，该测定提供了一种简单的方法来定量细胞中的RhoA活化。活化RhoA的量通过使用RhoA特异性抗体的蛋白质印迹确定。

作为Cytoskeleton全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cytoskeleton热销产品RhoA Pulldown 活化检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Cytoskeleton公司目前主要的产品有340余种，其产品主要覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒，并且产品线还在不断的扩大中。

产品名称	货号	详情
RhoA Pulldown 活化检测试剂盒	BK036	查看

ARhoA Pulldown 活化检测试剂盒内容：

该试剂盒包含足够的材料，可用于 80 次测定，具体取决于细胞中 Rho 的活化水平，并包括用于阳性和阴性对照的试剂。包括以下组件：

彩色琼脂糖珠上的GST标记Rhotekin-RBD蛋白（货号#RT02）
RhoA 特异性单克隆抗体（货号 # ARH03）
His标记的RhoA蛋白（货号#RH01）
GTPγS：（不可水解的 GTP 类似物）（货号 # BS01）
国内生产总值
细胞裂解缓冲液
洗涤缓冲液
加载缓冲区
停止缓冲
蛋白酶抑制剂混合物（货号 # PIC02）
包含详细协议和广泛故障排除指南的手册

RhoA Pulldown 活化检测试剂盒所需设备（图1）和示例结果（图2）：

BK036 中色彩鲜艳的谷胱甘肽琼脂糖珠使试剂盒易于使用

图1. BK036 中色彩鲜艳的谷胱甘肽琼脂糖珠使试剂盒易于使用。

BK036 RhoA活化测定的结果

图2.BK036 RhoA活化测定的结果。使用试剂盒BK036在蛋白质印迹中沉淀并检测活化的Rho。第一个泳道显示50 ng重组His标记的RhoA标准品（Rec. His-RhoA）。以下泳道显示了从等量的细胞裂解物中下拉非活性、负载 GDP 的 RhoA （RhoA-GDP PD）或活性、负载 GTPγS 的 RhoA （RhoA-GTP PD）。

Cytoskeleton专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药物筛选服务。