支原体(Mycoplasma)是一种缺乏细胞壁,高度多形性的最小原核细胞型微生物,大小通常为0.15-0.3um。由于其体积较小,支原体可以逃过细胞培养设施中的过滤系统。此外,部分支原体对于细胞培养中常用的大多数抗生素,如青霉素和链霉素等,具有耐药性。
在生物制药实验室中,需要进行支原体检测以确定是否存在支原体污染。在细胞培养实验室中,连续细胞系中的大多数支原体感染是由少至6种来自牛、猪和人等来源的污染物引起的。支原体易于通过气溶胶传播或不适当的无菌技术从感染的细胞培养批次传播到另一个批次。如果未被发现,支原体污染可能对细胞培养制备的质量和可靠性产生不可预估的影响。
因此,定期使用有效的检测方法来检测支原体污染的存在至关重要。支原体污染对生物制药和学术研究实验室都至关重要,因为它们会影响细胞特性和生物制品的安全性。
支原体的检测和清除有助于避免支原体污染带来的不可估量的后果,并确保生物制药产品的安全性和可靠的科学结果。为此,Assay Genie开发了支原体检测和支原体清除试剂盒。
支原体检测——1小时肉眼可辨结果, 无需PCR、qPCR、电泳
传统的支原体检测花费超过3h并需要在昂贵的设备上进行,成本高,耗时长。而Assay Genie的支原体检测试剂盒,可实现一步法快速检测,仅需1小时,即可用肉眼判断结果,同时可以实现对多达28种支原体的检测,包括与细胞培养物污染相关的8种最常见的支原体。它适用于各种悬液和贴壁细胞的支原体检测,包括CHO、Vero、杂交瘤、Sf9、HEK293等,此外,该试剂盒与广泛的细胞培养基和血清兼容,适用于生物制药公司、疫苗/单克隆抗体生产企业、细胞治疗/胚胎实验室等科研实验室的常规支原体检测。
货号 | MORV0011 |
名称 | Rapid Mycoplasma Detection Kit 支原体快速检测试剂盒 |
优势 | ? 一步法快速检测 ? 1小时肉眼可辨结果 ? 避免弱阳性、假阴性 ? 无需PCR、qPCR、电泳 ? 高灵敏度:≥500CFU/ul |
结果 | |
支原体28种 | A. laidlawii* M. hominis* M. arginini* M. fermentans* M. hyorhinis* M. salivarium* M. pirum* M. orale* A. granularum A. pleciae M. neophronis M. timone M. caviae M. alvi M. bovis M. primatum M. leopharyngis M. maculosum A. oculi M. iners M. gallinarum M.sphenisci M. bovigenitalium M. auris M. columbinum M. lipophilum M. falconis M. alkalescens |
支原体清除——杀死支原体,对细胞无毒
清除支原体的常用方法是使用抗生素,这虽然不会对细胞造成损伤,然而,像青霉素这样攻击细菌细胞壁的抗生素在这种情况下是无效的,因为支原体缺乏真正的细胞壁。有几种抗生素可以有效消除支原体,例如:泰乐菌素、新霉素、四环素和庆大霉素。然而,这些抗生素的功效仅限于特定的支原体物种,并且通常只能减少支原体的浓度,而不能对细胞培养进行消毒。因此,一旦清除结束,污染还会再次发生。
而Assay Genie支原体消除试剂盒可用于去除细胞培养、血清和培养基中的支原体。与传统抗生素不同,该试剂盒通过破坏膜结构来杀灭支原体,并且可以去除抗生素耐药的支原体,从而实现更有效的支原体消除,而不仅仅是抑制增殖。该试剂盒对革兰氏阴性和阳性细菌也具有一定的清除效果。
货号 | MORV0012 |
名称 | MycoGenie MycoPlasma Elimination Kit 支原体清除试剂盒 |
特点 | 结果表明,用支原体消除试剂孵育3-7天后,所有位于细胞内外的支原体均被成功去除。用此试剂盒处理一次后4个月内未发现再污染。该试剂盒可用于杀死大多数种类的支原体,并且对细胞无毒。该试剂盒已在大多数常用细胞系中进行了验证,包括小鼠和人胚胎干细胞或iPS细胞,HEK293, Hela, HepG2, HCT116, COS-7, Vero, Huh-7, MDCK, PANC-1, SW620和U2OS。 |
结果 |
支原体的快速检测试剂盒(cat#MORV0011)和高效清除试剂盒(cat#MORV0012)的联合使用:
使用支原体检测试剂盒(cat#MORV0011)进行支原体污染的检测。试管1:阳性对照; 试管2:第0天 ; 试管3:第3天(用支原体消除试剂cat#MORV0012处理3天后,小鼠胚胎干细胞培养液未检出支原体) ; 试管4:阴性对照。
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