抗原特异性CD8 T细胞检测小帮手—MHC Class I类五聚体

     器官移植手术的关键是手术前的基因配型，一般地，配型只需检测血液就可完成，患者血型和组织相容性是否与供体相配是决定器官移植成功与否的一个关键。其次，即便配型合适，组织移植时，还是可能会出现排斥反应。

      排斥反应的本质是细胞表面的同种异型抗原诱导的一种免疫应答，而这种代表个体特异性的同种异型抗原称组织相容性抗原，其中能引起强而迅速排斥反应的抗原称为主要组织相容性抗原（major histocompatibility antigen，MHA）。那么什么是MHC呢？

      所有物种中，编码MHA的基因是位于某一染色体的一组紧密连锁的基因群，统称为主要组织相容性抗原复合体（major histocompatibility complex，MHC）。MHC分子一般也指的是MHA，也即MHC编码的蛋白质，根据其化学结构和功能的不同，可分为MHC I、MHC II和MHC III类分子。MHC I和MHC II类分子具有相似的结构，在免疫反应中发挥抗原递呈作用。其中经典的I、 II类具有抗原递呈功能，其它一般不具备激活T细胞的功能。

小鼠的MHC被称为H-2（histocompatibility-2，H-2）

人类的MHC被称为HLA（human leukocyte antigen，HLA）

      今天我们先说说MHC I类——

      MHC I结构：由一条α链和一条β链通过非共价结合而成，分为胞外区、跨膜区和胞内区，α链为跨膜蛋白，胞外区有α1、α2、α3三个结构域，α1、α2组成肽结合区（结合抗原肽--大多由8-11个氨基酸组成），α3和T细胞表面的CD8分子结合，β链是可溶性的β2m微球蛋白。

      MHC I类分子生物学功能：介导内源性抗原（包括肿瘤细胞内合成的肿瘤抗原、病毒感染细胞合成的病毒蛋白等）的抗原提呈过程，过程包括抗原降解、抗原肽转运、MHC I类分子装配与荷肽、MHC I-肽复合物表达于细胞表面。

      抗原降解：细胞质中的蛋白质，包括由内质网转移至细胞质的部分膜蛋白和分泌蛋白，在泛素的帮助下，通过蛋白酶体系统的降解途径将抗原降解为短肽。

      抗原肽转运：由蛋白酶体降解形成的抗原肽，需要被转运至内质网中，才能与其中的MHC I类分子发生结合，这个转运过程是由内质网膜上的抗原加工转运相关蛋白（transport associated with antigen processing，TAP）所完成，TAP由两个亚单位TAP1和TAP2组成。TAP对肽段的转运具有一定的选择性，可将较适合MHC I类分子结合的肽从胞浆转运至内质网腔。

      MHC I类分子装配与荷肽：MHC I分子与抗原肽的结合过程简称荷肽，粗面内质网中新合成的MHC I类分子α链进入光面内质网，在辅助蛋合帮助下折叠成立体结构并与β2m结合。当抗原肽通过TAP进入内质网时，合适的肽就与MHC  I类分子结合。与肽结合形成肽-MHC I类分子复合物后，稳定地附着在内质网膜上，进一步通过高尔基体胞吐空泡运送到细胞表面，小泡的膜与细胞膜融合，肽-MHC I复合物即稳定地表达于细胞膜表面。

      MHC I-肽复合物表达于细胞表面：MHC I类分子必须与抗原肽结合，才能在细胞表面稳定地表达，并进一步将抗原递呈给CD8+T细胞识别。

      MHC I类五聚体技术就是利用了MHC I分子在与抗原肽结合后与抗原特异性CD8+T受体（TCR）相结合，通过流式细胞术检测荧光素信号作为readout，进而可以得知特异性结合抗原肽的CD8+T细胞群的比例并可利用分选仪将这些细胞分离出来，达到检测和筛选CD8+T细胞的目的。MHC I类五聚体技术只是将MHC I分子从自然状态下细胞表面分布变成了可溶性蛋白分子，以及将自然状态下的单体变成了五聚体以提高分子结合的稳定性。而且MHC I五聚体标记灵活，有生物素标记和荧光素标记，整体荧光素亮度更高，稳定性更好。

      MHC-肽复合物（肽:红色、MHC:深蓝色），卷曲螺旋结构域（浅蓝色），荧光素标记（粉色）

      ProImmune是生产MHC I型五聚体--检测抗原特异性CD8+T细胞的全球领导品牌，相关产品广泛应用于各类疾病致病机理研究以及疫苗药物的研发及效能评估。

     目前厂家可提供如下研究指标的MHC I类五聚体，您可以根据抗原肽指标或者序列进行选择：

      MHC I类五聚体抗原指标目录

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