Rockland热销产品胶原酶4型解决方案

背景

粗胶原酶制剂含有两种不同胶原酶的几种亚型，一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨基肽酶。这种胶原溶解和蛋白水解活性的组合可有效分解细胞间基质，这是组织解离的重要组成部分。该复合物的一种成分是水解酶，其优先降解天然胶原蛋白中的螺旋区域，优先在序列Pro-Y-Gly-Pro中的Y-Gly键处降解，其中Y通常是中性氨基酸。这种裂解产生易受进一步肽酶消化的产物。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制，但不受DFP抑制。它还被α2-巨球蛋白（一种大的血浆糖蛋白）抑制。Ca2+是酶活性所必需的。每种胶原酶的特定酶谱与获得待研究细胞的组织（或与放置细胞的用途）相关，并且由于相关性，已经建立了几种类型的粗胶原酶。粗胶原酶广泛用于酶原代细胞分离和组织解离程序。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂，例如 1、2、3 和 4 型或色谱纯化的胶原酶;后者通常与弹性蛋白酶、透明质酸酶等次级酶结合。胶原酶是专注于干细胞和生物标志物研究的研究的理想选择。   

作为Rockland全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Rockland热销产品胶原酶4型。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

胶原酶4型应用说明：

4型胶原酶含有较低的胰蛋白酶活性水平，以限制对膜蛋白和受体的损伤，但胶原酶活性正常至高于正常水平。建议用于胰岛原发性分离。胶原酶通常在平衡盐溶液（如Hank's，Earle's等）中以0.05%至0.5%（w / v）的浓度使用。为了获得最佳结果，胶原酶和蛋白水解活性的精确混合物必须针对要解离的组织进行调整。反应性的具体条件应由最终用户优化。  

纯度/特异性

4型胶原酶被部分纯化，其胰蛋白酶活性特别低，以限制对膜蛋白和受体的损伤。胶原酶测定是Mandl胶原消化程序的修改，其中胶原酶与天然胶原蛋白一起孵育五小时，并使用Moore和Stein，JBC，176，367，（1948）比色茚三酮方法确定胶原蛋白分解的程度。释放的氨基酸在5°C，pH 37.7下5小时内以微摩尔L-亮氨酸每毫克胶原酶表示。酪蛋白酶活性是非特异性蛋白水解活性的量度，使用上述测定法测定，并用25毫克无维生素酪蛋白代替胶原蛋白底物。酪蛋白酶活性的计算与胶原酶活性相同。在2.5mM二硫苏糖醇（DTT）中激活后测量clostripain活性。活化后，一个单位在 25°C、pH 7.6 下每分钟水解一微摩尔的 BAEE。胰蛋白酶活性使用与梭菌蛋白酶相同的BAEE方法测定，但没有活化。   

相关参数：

• 描述：胶原酶 4 型 - MB-121-0100

• 同义词：溶组织梭菌，细菌胶原酶，胶原酶，酪蛋白酶，梭菌蛋白酶，胰蛋白酶，ColH，ColG

• 原产物种：溶组织梭菌

• 试剂类型：酶

• 物理状态：冻

• 浓度：270 u/mgdw（按干重计）

• 缓冲区：没有

• 防腐剂：没有

• 稳定：没有

• 复溶体积：10.0毫升

• 重构缓冲区：用去离子水（或同等水）恢复

• 运输条件：氛围

• 储存条件：打开前将小瓶储存在2-8°C。将内容物分装并在 -20° C 或更低温度下冷冻以延长储存时间。避免冷冻和解冻的循环。离心机产品在室温下静置后如果不能完全澄清。仅在立即使用前稀释。

• 呼气：有效期为自收到之日起一 （1） 年。

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