上一章我们学习了B细胞ELISpot分析,这一章我们继续深入,学习B细胞FluoroSpot分析。复习Mabtech畅销特色B细胞ELISpot检测工具
B细胞FluoroSpot
B细胞FluoroSpot是在ELISpot基础上发展起来的新方法,但不是用酶促反应来检测,而是用荧光检测。它继承了ELISpot高灵敏度的特性,并具备多重检测的能力,能同时检测几个分析物,特别适用于细胞数量较低时的检测。
B细胞FluoroSpot是对分泌的免疫球蛋白进行直接检测的有力工具。可用来直接计数抗体分泌细胞(ASCs)和长期记忆B细胞。相对于常用的细胞流式而言,B细胞FluoroSpot能在十万个细胞中实现对单个抗原特异性B细胞进行定量检测,因而具有极高的灵敏度。并且由于其具备多重检测的能力,因此能研究多种抗原并定义免疫球蛋白亚群。B细胞FluoroSpot的主要应用包括检测B细胞对感染和疫苗接种引起的反应。
具体步骤:
1.预包被。单克隆捕获抗体或抗原加入到经乙醇处理的PVDF膜板上;
2.细胞孵化。细胞被加入到孔板中,并分泌抗体。
3.捕获抗体。分泌抗体就近被预包被的抗体或抗原捕获;
4.检测。加入荧光标记的检测抗体,直接检测。
5.斑点计数(可人工计数,也可用自动读板仪计数),数据处理,结果分析。
应用
1.抗原可以直接连接到一个荧光基团或重组表达的蛋白标签(如WASP,GAL),并以带抗体标签的共轭抗体进行检测。这就实现了在一个孔板中分析多种抗原。
2.分泌抗体就近被预包被的抗体或抗原捕获,并用荧光标记的共轭检测抗体检测分泌抗体,从而实现定义免疫球蛋白亚群。
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产品应用类型 | 产品名称 | 产品货号 | 规格 | 适用种属 |
FluoroSpot | Mouse IFN-γ/IL-2 FluoroSpot PLUS kit | FSP-4142-2 | 2块板子 | 小鼠 |
Human IFN-γ/Granzyme B FluoroSpot kit, pre-coated | FSP-0110-10 | 2块板子 | 人 | |
Mouse IFN-γ/IL-2 FluoroSpot kit | FS-4142-10 | 2块板子 | 小鼠 | |
Human IgG/IgA/IgM FluoroSpot kit | FS-050617-10 | 2块板子 | 人 |
PS:以上仅列出部分产品,此外Mabtech还提供其他规格包装的各种试剂产品。
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【品牌介绍】
Mabtech公司于1986年创办于瑞典,是一家欧洲的集研究,开发,销售,技术支持为一体的高科技免疫生物技术公司。Mabtech公司始终专业致力于研发新的单克隆抗体,生产创新的免疫试剂和销售高品质的全配套的免疫试剂盒。公司核心业务是致力于优化发展酶联免疫斑点法技术 (ELISpot)、荧光免疫斑点法技术 (FluoroSpot) 和酶联免疫吸附试验技术 (ELISA) 等免疫学方法。公司开发和生产多种针对细胞因子,免疫球蛋白和载脂蛋白的单克隆抗体,用于生命科学研究中的体外应用。Mabtech的试剂盒可用于研究感染性疾病,癌症,过敏,移植等免疫反应,通常用作疫苗试验中的监测工具。此外,还生产用于兽医和心血管研究的试剂盒。
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