纤连蛋白是从牛血浆中纯化的。蛋白质纯度通过在4-20%聚丙烯酰胺凝胶上扫描考马斯蓝染色蛋白质的密度测定来确定。生物素化的纤连蛋白纯度为>80%(图1)。
蛋白质被修饰以在随机表面赖氨酸中含有共价连接的生物素。生物素的长链活化酯[biotin-XX,琥珀酰亚胺酯]用于标记蛋白质。标记效率取决于使用碱性磷酸酶偶联链霉亲和素检测 10 ng 生物素化纤连蛋白的能力(图 2)。
纤连蛋白在SDS-PAGE上作为单个亚基运行,表观分子量为230 kDa。FNR03以白色冻干粉末形式提供。每个小瓶含有20μg蛋白质。
作为Cytoskeleton全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cytoskeleton热销产品纤维连接蛋白 生物素 (牛血浆)。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
Cytoskeleton公司目前主要的产品有340余种,其产品主要覆盖肌动蛋白,微管蛋白,马达蛋白,小G蛋白,细胞外基质,活细胞成像等相关领域,提供对应的蛋白质,抗体,检测与分析试剂盒,并且产品线还在不断的扩大中。
产品名称 | 货号 | 详情 |
纤维连接蛋白 生物素 (牛血浆) | FNR03-A | 查看 |
纤维连接蛋白 生物素 (牛血浆)用途包括:
Rho通路的激活剂
研究Rho活化对细胞运动的影响
研究Rho活化对肌动蛋白细胞骨架重排的影响
研究Rho激活对与其他信号转导通路串扰的影响
纯度是通过SDS-PAGE凝胶上蛋白质的扫描密度测定法确定的。样品纯度为>80%。
图1:纤连蛋白纯度测定 图例:在50-4%SDS-PAGE系统中通过电泳分离20μg生物素化纤连蛋白。蛋白质用考马斯蓝染色。使用精密红色?蛋白质测定试剂(货号#ADV02)测定蛋白质定量。Mark12分子量标记物来自Invitrogen。 |
图2:生物素化纤连蛋白的检测 图例:在4-20%聚丙烯酰胺凝胶上通过电泳分离生物素化纤连蛋白的连续稀释液,印迹至PVDF,用1:1000稀释的链霉亲和素碱性磷酸酶(Sigma)探测,并用1步NBT/BCIP试剂?(Pierce)检测。泳道 1,100 ng,泳道 2,50 ng,泳道 3,40 ng,泳道 4,20 ng 和泳道 5,10 ng 生物素化纤连蛋白。Lane M,SeeBlue?分子量标记物(Invitrogen)。箭头表示生物素化纤连蛋白。 |
纤维连接蛋白 生物素 (牛血浆)引用文献:
Pankov R and Yamada KM. 2004. Non-radioactive quantification of fibronectin matrix assembly. Curr. Protocols in Cell Biol. S25, 10.13.1—10.13.9.
Lehnert M, et al. 2011. Adsorption and conformation behavior of biotinylated fibronectin on streptavidin-modified TiO(X) surfaces studied by SPR and AFM. Langmuir, 27, 7743-7751
Cytoskeleton专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰(PTM)、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品,尤其以细胞骨架相关研究见长,既能满足于样品较少的科学研究,也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外,公司还提供微管蛋白,肌动蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等现有产品的药物筛选服务。
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