Mabtech畅销特色B细胞ELISpot检测工具

酶联免疫斑点实验（enzyme linked immunospot assay.ELISpot）是一种在96孔板内的一百万个细胞中实现对单个分泌细胞进行定量检测的新型的免疫酶技术。灵敏度高，易操作，成本相对流式细胞术较低，已被广泛应用于癌症研究，疾病探索以及疫苗研发等领域。

ELISpot原理：将细胞置于包被有特异性抗体的96孔板中培养，在有刺激的条件下，细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被抗体捕获。移除细胞后，被捕获的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识，其后再与酶标记的亲和素作用，并加入底物使其呈色，有反应作用的细胞会留下直径大小不等的染色斑点。

具体步骤：

1.加入细胞到含有（或不含）刺激物中培养；

2.阳性细胞开始分泌细胞因子，细胞因子就近被包被抗体捕获；

3.移出细胞，清洗板子，加入生物素标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-抗体”夹心结构；

4.为了观察膜上斑点的形成，加入酶标记的亲和素；

5.加入显色底物，在酶的催化分解下，生成不可溶的色素，就近沉淀在局部的膜上形成斑点；

6.斑点计数（可人工计数，也可用自动读板仪计数），数据处理，结果分析。

B细胞ELISpot

B细胞ELISpot是对分泌的免疫球蛋白进行直接检测的有力工具。可用来直接计数抗体分泌细胞（ASCs）和长期记忆B细胞。相对于常用的细胞流式而言，B细胞ELISpot能在十万个细胞中实现对单个抗原特异性B细胞进行定量检测，因而具有极高的灵敏度。B细胞ELISpot的主要应用于检测B细胞对感染和疫苗接种引起的反应。

B细胞ELISpot检测需要捕获和检测抗体或抗原，采用夹心法对抗体分泌细胞ASCs进行计数。总Ig B细胞ELISpot（A）捕获和检测所有的ASC抗体，会以两种方式同时进行。一种是反向ELISpot（B），利用标记抗原进行检测；另外一种是传统的ELISpot (C)：将抗原包被在孔板上，利用标记抗体进行检测。不管是哪种方式，每一个斑点都只对应一个细胞。

反向ELISpot在检测抗原特异性细胞方面具有几大优势：它产生的斑点更加清晰，同时不存在抗原变性的风险；此外，它还大大减少了每次检测所需的抗原数量。

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【品牌介绍】

Mabtech公司于1986年创办于瑞典，是一家欧洲的集研究，开发，销售，技术支持为一体的高科技免疫生物技术公司。Mabtech公司始终专业致力于研发新的单克隆抗体，生产创新的免疫试剂和销售高品质的全配套的免疫试剂盒。公司核心业务是致力于优化发展酶联免疫斑点法技术 (ELISpot)、荧光免疫斑点法技术 (FluoroSpot) 和酶联免疫吸附试验技术 (ELISA) 等免疫学方法。公司开发和生产多种针对细胞因子，免疫球蛋白和载脂蛋白的单克隆抗体，用于生命科学研究中的体外应用。Mabtech的试剂盒可用于研究感染性疾病，癌症，过敏，移植等免疫反应，通常用作疫苗试验中的监测工具。此外，还生产用于兽医和心血管研究的试剂盒。

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