KRIBIOLISA 双链 RNA (dsRNA) ELISA(基于 J2)kit:
稳健灵敏的酶免疫测定法,用于定性/半定量筛选基于mRNA的制剂中的双链RNA。我们建议使用 ELISA 检测核酸提取物中的病毒 dsRNA 或非病毒来源的大型天然或合成 dsRNA,以及检测人工合成的 (m)RNA 制剂中是否存在不需要的 dsRNA 分子。dsRNA标准品的连续稀释液(包含在试剂盒中)可用作阳性定量对照。
艾美捷KRIBIOLISA? 双链 RNA (dsRNA) ELISA(基于 J2)kit #KBBA56特点:
- 直接夹心测定,具有更好的特异性
- 预涂板
- 预先优化和验证,即用型,无需在用户端进行额外验证
- 回收率: 95 - 100%
KRIBIOLISA 双链 RNA (dsRNA) ELISA(基于 J2)kit检测原理:
KRIBIOLISA 双链 RNA (dsRNA) ELISA 采用定量夹心酶免疫测定技术。它基于使用两种双链RNA(dsRNA)特异性单克隆抗体,可以灵敏和选择性地检测dsRNA分子(>=40 bp),而不受其核苷酸组成和序列的影响。dsRNA (J2) 抗体预包被到微孔上。将样品和标准品移液到微孔中,并由捕获抗体结合。然后,将HRP(辣根过氧化物酶)偶联的抗dsRNA (K1)移液并孵育。洗涤微孔以去除任何非特异性结合后,将即用型底物溶液(TMB)添加到微孔中,颜色与样品中dsRNA的量成比例发展。然后通过添加终止溶液停止显色。在450nm处测量吸光度。
KRIBIOLISA 双链 RNA (dsRNA) ELISA(基于 J2)kit检测程序:
使用前将所有试剂置于室温。强烈建议所有控件和示例应重复或一式三份运行。
在各自的孔中加入100ul制备的阳性对照/标准品和样品。
密封板并在 37*C 下孵育 120 分钟。
吸出并用洗涤缓冲液(4X)洗涤板1次,并通过在吸收纸上用力倒置板来吸干残留缓冲液。擦拭微量滴定孔外底部的任何液体,因为任何残留物都会干扰读数步骤。
向所有孔中加入100ul的dsRNA特异性K1检测:HRP偶联物。
密封板并在 37*C 下孵育 60 分钟。
重复洗涤步骤(4)。
在每个孔中加入100ul的TMB底物。
将微孔板在室温下在黑暗中孵育30分钟。请勿摇晃,否则可能会导致更高的背景和更差的精度。阳性孔应变成蓝色。
移出 100 ul 的停止溶液。井的颜色应该从蓝色变成黄色。11.用酶标仪读取450nm处的吸光度。
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