全系列花青（Cyanine）染料-你想要的Cy我全都有

相信各位经常接触荧光染料的专家们对于Cy系列的染料一定不陌生，经常有小伙伴咨询我们：您家有Cy3和Cy5染料吗？Cy7了？但许多品牌都只有Cy系列中的一种或者几种，经常没办法满足客户的需求，本期我们就给大家带来了全套的Cy系列染料，你想要的Cy我全都有，满满的安全感。

Cy是花青（Cyanine）的缩写，“花青”（Cyanine）这个名词是来自于聚次甲基组合成染料家族中的，它是一个非系统名称，cyanine一词源自英语单词“ cyan”，通常表示蓝绿色。 花青染料的摩尔消光系数（约150,000至300,000 M-1cm-1）非常大，结合适度的量子产率，使它可以产生极其明亮的荧光信号。

例如，吸光度和荧光波长可通过选择聚次甲基桥长来控制：更长的花青素具有较高的吸光度和发射波长，直至近红外区域。

虽然许多花青类染料已用于生命科学应用中，例如一系列噻唑和恶唑染料已被用作结合DNA和蛋白质的染料（如TOTO，YOYO，Stains All等）。但最受欢迎的花青染料是在1990年代初期，通过卡内基·梅隆大学的艾伦·瓦格纳（Alan Wagoner）及其同事才应用到生命科学研究中的。花青染料是自1970年代以来用于血管造影的花青染料吲哚菁绿（ICG）的变体。

花青染料有两种：非磺化花青和磺化花青。对于绝大多数应用，它们是可互换的，因为它们的光谱特性几乎完全相同。磺化和非磺化染料均可用于标记生物分子，例如DNA和蛋白质。他们之间的主要区别在于它们的溶解度：磺化染料是水溶性的，它们在水性环境中不需要使用有机助溶剂即可进行标记。

1. 非磺化花青染料

可用的非磺化染料包括Cy3，Cy3.5，Cy5，Cy5.5，Cy7和Cy7.5。CY ?代表“Cyanine”，第一位数字标识假吲哚基团之间的碳原子数。Cy2是恶唑衍生物而不是吲哚洛宁，是该规则的例外。添加后缀“.5”表示苯并融合的花青。结构的变化使得染料的荧光性质发生变化，花青系列的荧光基团可覆盖可见光和近红外光谱的最重要部分。

大多数非磺化花青的衍生物（酰肼和胺的盐酸盐除外）的水溶性都很低，当这些分子用于生物分子标记时，为了能够有效的发生反应，必须使用有机助溶剂（DMF或DMSO的5-20％）。首先将花青染料溶解在有机溶剂中，然后在适当的极性缓冲液中稀释再使用。

非磺化花青的荧光性质对溶剂和周围环境的依赖性很小，非磺化花青染料的吸光度和荧光光谱绘制如下：

2. 磺化花青染料

磺化花青包括磺酸基，能有效增加其在水中的溶解度，带电的磺酸根基团减少了染料分子和重标记物间的聚集。

当前可用的磺化花青包括磺基-Cy3，磺基-Cy5和磺基-Cy7。

磺化花青高度水溶性，用这些试剂进行标记不需要有机溶剂祝融。

磺化与非磺化花青标记时的区别：

磺化和非磺化花青显示出非常相似的荧光性质，但是应注意标记步骤中的一些差异。

1.非磺化花青必须在使用前溶解在有机溶剂（DMF或DMSO）中，并添加到含有目标分子的溶液中。

2.纯化方面也有区别：当使用水或水性缓冲液进行纯化时，必须使用磺基花菁来有效去除未反应的染料。当通过凝胶过滤，色谱法（HPLC，FPLC，离子交换层析）或电泳进行纯化时，磺基化和非磺基化的花青都是可以反应的。

磺化和非磺化花青可互换用于标记多种目标分子，包括：

1.可溶性蛋白质，可耐受添加有机助溶剂

2.抗体（使用DMSO / DMF的5-10％）

3.DNA和寡核苷酸

4.肽

5.许多小分子

用类似的磺化和非磺化试剂（例如，磺基-Cy5和Cy5）生产的共轭物的荧光性质非常相似，可与各种荧光仪器兼容。

必须用磺化花青的目的情况：

1.DMF或DMSO变性的敏感蛋白

2.蛋白质-染料缀合物通过透析进行纯化时

3.水溶液中的纳米颗粒

4.不溶或疏水蛋白

必须用非磺化花青的情况：

标记反应在有机介质（二氯甲烷，乙腈）中进行

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