【复盘】Comet Assay Kits彗星检测试剂盒常见问题

彗星实验（Comet assay）也被称为单细胞凝胶电泳实验（Single cell gel electrophoresis，SCGE），是一种在单细胞水平上检测DNA损伤的技术。

彗星分析专用玻片

彗星分析试剂盒

常见问题解析：

Q1：彗星玻片是否可以单独提供？

A1：可以的。有对应单独玻片的产品：cat#STA-352  3孔/玻片,共5片；cat#STA-353 3孔/玻片,共25片；cat#STA-356 96孔/玻片,共1片

Q2：彗星玻片可以重复使用吗?

A2：不能。彗星玻片表面经过了特殊处理，一旦整个玻片经历了变性，电泳和洗涤的操作步骤，就不能再重复使用了。

Q3：可以用常规载玻片代替试剂盒中的彗星玻片吗？

A3：不能，彗星玻片经过化学预处理，以增加附着力。如果采用常规载玻片的话，您的细胞/琼脂糖液滴将无法停留在载玻片上。

Q4：彗星玻片有多厚？

A4：1.0mm（底层厚度，不包含蓝色层）

Q5：该彗星分析试剂盒适合用哪种电泳仪？

A5：该彗星分析试剂盒可用于任何水平电泳槽，不限于任何特定型号，但不能使垂直电泳仪。

Q6：该试剂盒是否适用于植物组织样本？

A6：可以用于植物组织。彗星试剂盒用于检测单细胞悬液的DNA损伤，与任何细胞类型兼容，只要将样本制备为单细胞悬液即可。

Q7：用试剂盒的Vista Green染料染色后，玻片可以保存多久？

A7：用Vista Green染色后的玻片可在4℃的黑暗环境中保存3个月，荧光也不褪色。 干燥且未沾有Vista Green的载玻片可以保存一年。

Q8：说明书中配置电泳液的过程中没有提到是否需要灭菌？

A8：不需要灭菌。如果配置的过程中发现有不溶物，可以进行过滤处理。

Q9：什么是好的阳性对照？

A9：用20uM依托泊苷(etoposide)培养细胞4小时，作为彗星实验的阳性对照。

Q10：是否有化合物诱导DNA损伤的彗星分析数据供参考呢？

A10：与ELISA不同，彗星实验不提供对照，因为任何彗星实验结果都将根据实验条件的不同而变化。例如，如果电泳条件不同，则包含相同数量 DNA 损伤的细胞的尾巴大小可能会不同。所以，与我们的结果或其他研究人员的结果进行比较将毫无意义，因为两者之间的条件永远不会相同。如果您有兴趣测试化合物对DNA损伤的影响，建议保持所有实验条件一致，并使用相同的运行时间和软件进行分析。

Q11：如何防止琼脂糖凝胶从载玻片上脱落？

A11：彗星玻片经过化学处理，表面带有粘性，可吸附琼脂糖。琼脂糖从玻片上脱落，主要是因为琼脂糖-细胞混合液添加到玻片孔上时，未完全覆盖。必须保证琼脂糖凝胶完全覆盖在孔上，另外玻片始终保持水平状态也很重要。

2020~2021最新发表文章：

1.Maksimova, V. et al. (2021). HeLa TI cell-based assay as a new approach to screen for chemicals able to reactivate the expression of epigenetically silenced genes.PLoS One.16(6):e0252504. doi: 10.1371/journal.pone.0252504.

2.Chong, S.J.F. et al. (2020). Serine-70 phosphorylated Bcl-2 prevents oxidative stress-induced DNA damage by modulating the mitochondrial redox metabolism.Nucleic Acids Res. doi: 10.1093/nar/gkaa1110.

3.Prendergast, L. et al. (2020). Histone chaperone FACT is essential to overcome replication stress in mammalian cells.Oncogene. doi: 10.1038/s41388-020-1346-9.

4.Kong, L.R. et al. (2020). Targeting codon 158 p53-mutant cancers via the induction of p53 acetylation.Nat Commun.11(1):2086. doi: 10.1038/s41467-020-15608-y.

5.Kisin, E. R. et al. (2020). Enhanced morphological transformation of human lung epithelial cells by continuous exposure to cellulose nanocrystals.Chemosphere. doi: 10.1016/j.chemosphere.2020.126170.

作为一家具有高端的技术实力、先进的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业，总部位于武汉光谷高新技术开发区，服务面向全国。艾美捷科技是集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司，为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品、整合的解决方案，及优质的物流服务。

艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商优保持着密切的合作关系，目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理，主要包括：AmyJet、AATBioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Atlas Antibodies、Biosensis、Biovision、BioVendor、CaissonLabs、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、HycultBiotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、NorgenBiotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、SolisBioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、USBiological、TRC等，可以在短时间内为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品及物流服务。