【产品组合】Norgen全血采集管+血浆/血清RNA和DNA纯化

血液含有细胞和无细胞游离核酸。当细胞死亡时，细胞内的物质会被释放出来，包括 DNA和RNA。血液中不受保护的核酸被核酸酶消化。与蛋白质结合和包含在外泌体内的DNA和RNA被保护不被降解——被称为无细胞循环DNA/RNA（cf-DNA/cf-RNA）。

（1）在血浆中发现cf-DNA/cf-RNA；

（2）表现为正常的cf-DNA、循环肿瘤 DNA（ct-DNA）或cf-RNA；

（3）癌症检测的重要生物标志物包括ct-DNA和cf-RNA；

（4）通常以低丰度存在：1-100 pg/uL。

Norgen全血采集管

市面上血样通常收集在含EDTA（抗凝剂）等的收集管中，但这需要在装运前立即处理或冷冻。

痛点：

（1）昂贵的干冰运输；

（2）因延误造成珍贵样品损失；

（3）试验样本收集的地域限制。

Norgen 的防腐剂（保护剂）允许在室温下将DNA和RNA保存在一管中，以便储存和运输——长达30天。艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商，为您推荐独家代理Norgen Biotek品牌的全血采集管：cf-DNA/cf-RNA Preservative Tubes (#63950/Dx63950)。

优势：

（1）在室温下将cf-DNA和cf-RNA保存30天；

（2）在室温下保存 CTCs 14 天；

（3）无甲醛 = 无DNA交联；

（4）防止血细胞凋亡和基因组DNA片段化；（*防止血浆被基因组DNA污染）

（5）防止溶血和血浆污染；（*防止溶血=运输后无血浆损失）

（6）抽真空以在10mL PET管中抽取8.4mL血液；

（7）多个关键应用：诊断（血液生物标志物）、SNP 发现和基因分型、NIPT（无创产前检测）、表观遗传研究、药物基因组学研究、液体活检（癌症检测和监测）和下一代测序（基因组和转录组）。

（8）相比于其他竞争对手：

痛点：

① 其他竞争对手保存所有核酸、外泌体和CTCs需要多个管；而Norgen可以保存所有的核酸，外泌体和CTCs；

② 用其他管的保存时间更短；而Norgen的全血收集管在室温下将cf-DNA和cf-RNA保存30天；

③ 用其他管在高温（最高37℃）保存时间短；而Norgen的全血收集管在37°C下保存长达8天。

血浆/血清RNA和DNA纯化

目前DNA和RNA的常见的纯化方法是使用苯酚 : 氯仿和硅胶色谱柱。

（1）苯酚 : 氯仿——捕获总RNA，价格便宜，但苯酚是抑制剂，需要进一步清理；苯酚和氯仿是有害的等；

（2）硅胶色谱柱——不是RNA的最佳选择（偏向于结合较大的片段），也可能需要使用载体RNA等；

痛点：

① 酚类物质是抑制剂，在下游应用前需要进一步清除；

② 苯酚和氯仿是有害的；

③ RNA载体不适合NGS（例如RNA-seq）；

④ 其它方法会使得RNA多样性缺失。

Norgen Biotek品牌专利性的纯化方法和技术：碳化硅色谱柱（Silicon Carbide）。

优势如下：

（1）无大小偏差的RNA分离；

（2）捕获真正的总 RNA，包括小RNA（加上microRNA和siRNA），无需 RNA 载体或苯酚；

（3）提供2种形式：

① 柱提法（Column）

1.a) 用于较小的样品上样量；

2.b) 样品通过预先装有树脂的色谱柱；

② 浆液形式（Slurry）

1.a) 用于更大的样品上样量；

2.b) 样品与悬浮在缓冲液中的树脂混合；

（4）两种形式均可捕获血浆中的所有cf-DNA和cf-RNA（宿主，病毒等）。

可以手动纯化血浆/血清中的cf-DNA和cf-RNA，也可以使用自动化试剂盒与各种开放式自动化机器/液体处理设备兼容。可用于在一次洗脱中纯化仅cf-DNA，仅cf-RNA，cf-DNA和cf-RNA，或在单独洗脱中同时纯化cf-DNA和cf-RNA。

举例如下：

血浆/血清RNA纯化的主要亮点：

（1）分离所有大小的循环和外泌体RNA，包括microRNA；

（2）不含有害苯酚或氯仿；

（3）不使用载体RNA；

（4）结合和洗脱所有RNA，无论大小或GC含量如何，无偏差；

（5）在35-40分钟内纯化高质量RNA；

（6）纯化的RNA不含抑制剂，适用于各种下游应用，包括二代测序（如small RNA-seq）。

Tips：低丰度RNA的定量

（1）无法使用NanoDrop进行定量。需要其它方法。

（2）请参阅Application Note 47 - Revised Guidelines for RNA Quality Assessment for Diverse Biological Sample Input.

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