免疫球蛋白Y（IgY）亲和纯化填料，快速、简单从样本中纯化IgY

免疫球蛋白Y（Immunoglobulin Y，IgY）是鸟类（如鸡、鸭等）血清和蛋黄中的主要免疫球蛋白，可以识别和结合特定的抗原，鸟类通过产生IgY来应对感染和疾病，保护自身免受病原体的侵害。与免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）相比，IgY显示出明显的结构差异，其包含三个恒定的重结构域(与哺乳动物的两个结构域相反)，并且缺少轻链和重链之间的铰链区域。IgY具有更长的半衰期，可以在鸟类体内更长时间地提供免疫保护。此外，IgY还具有较强的耐热性和耐酸性，这使得它在某些应用中具有优势。由于IgY的特殊性质和广泛的应用前景，研究人员和产业界对其进行了广泛的研究和开发。利用鸟类产生的IgY抗体，可以开发出各种应用，包括抗体生产、免疫诊断、生物制药等。同时，IgY亲和层析树脂也被广泛应用于IgY的纯化和富集过程中，以获得高纯度的IgY。

Biogradetech可同时提供高品质的IgY亲和层析介质和预装柱，可以快速、简单从样本中纯化IgY：

使用方法如下：

溶液制备

结合缓冲液：0.02 M PB，0.5 M K 2 SO 4 ，pH 7.5，0.45 μm 滤膜过滤。 

洗脱缓冲液：0.02 M PB，pH 7.5，0.45 μm 滤膜过滤。 

再生液：0.02 M PB，30%异丙醇，pH 7.5。  

平衡: 使用 3-5 倍柱体积（以下简称 CV）的 buffer A 清洗柱子，再使用 3-5 CV 的 buffer C 清洗，最后使用 3-5 CV 的 buffer A 平衡（平衡至基线）。

上样：根据介质载量和工艺需求选择合适的样品量进行上样（固体样品请使用 buffer A 配制，液体样品可使用 buffer A 进行透析）。

淋洗：使用 3-5 CV 的 buffer A 清洗柱子（淋洗至基线）。

洗脱：使用 15 CV 的 buffer B 进行洗脱，并根据紫外峰收集洗脱样品。可以采用线性洗脱和阶梯式梯度洗脱两种方式进行。

再生：在进行一定次数的使用后（具体使用次数和上样中的污染物有关），需要对柱子进行再生，以下提供一种方法：首先用 3-5 CV 的纯水清洗层析柱，然后可用 0.02 M PB+30%异丙醇，pH 7.5 清洗 7-10 CV，再用纯水清洗 7-10 CV，最后用 20%乙醇冲洗 2-3 CV，并置于 4-30 ℃环境中保存。

在位清洗：为了避免不同样品间的相互干扰，或者当介质污染比较严重时（反压增加），需要对介质进行在位清洗。 

（1）对于以离子键结合的蛋白，可用 2-3 CV 以上的 2 M NaCl 清洗，并用 3 CV 以上的纯 水冲洗。 

（2）对沉淀蛋白、以疏水性结合的蛋白或脂蛋白，可用 2-3 CV 的 1M NaOH 清洗（10-20 min），并用 5-10 CV 平衡液和 3 CV 以上的纯水冲洗。 

（3）对疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用 5-10 CV 的 70%乙醇或 30%异丙醇 清洗（15-20 min），并用 5-10 CV 的纯水冲洗。 此外，也可用 2 CV 含去污剂的碱性或酸性溶液清洗。如用 0.1-0.5%的非离子去污剂+0.1 M 乙酸冲洗 1-2 h，并用 5-10 CV 的 70%乙醇冲洗去除去污剂，然后用 5-10 CV 的纯水冲洗。  

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