Synaptic Systems：用单克隆重组兔抗-Fos抗体226 008改进c-Fos实验

原癌基因c-fos属于即刻早期基因（IEGs），在大脑中快速且短暂地表达（Herrera和Robertson，1996）。它可以被各种刺激诱导，通常用作神经元激活的标记（Morgan等人，1987；Gaiddon等人，1996；Chowdhury等人，2000；Gallo等人，2018；Wakhloo等人，2020）。像许多其他IEGs一样，c-Fos是一种转录因子。它与c-Jun形成异二聚体结合到AP-1结合位点，并增强许多其他涉及增殖、分化、凋亡或炎症的基因的表达（Ye等人，2014）。

异二聚体bZIP转录因子c-Fos/c-Jun与DNA结合的图示

您的c-Fos实验的关键技术参数

动物处理：在规划涉及动物的c-Fos实验时，您应该意识到可能影响您研究的技术陷阱。例如，您应该考虑到c-Fos表达是时间依赖的，易受压力影响，并且可以在几分钟后被检测到（Herrera和Robertson，1996）。重要的是要考虑到许多因素，如动物处理本身（例如，针头注射）或在黑暗期暴露于光线下（昼夜节律激活）可能会影响c-Fos表达（Asanuma和Ogawa，1994；Herrera和Robertson，1996）。因此，实验必须精确规划和进行，并设置适当的对照组，以避免假阳性结果。

IHC协议：您还应该关注的另一个点是您的免疫组织化学（IHC）协议。似乎c-Fos阳性细胞的总数是阈值依赖的。许多参数影响可检测的c-Fos阳性细胞数量：组织储存条件、切片方法（冷冻切片机或振动切片机）、染色参数（例如，孵化温度）、信号增强试剂（Berghorn等人，1994；Werner等人，1996；Mayer和Bendayan，2001），以及最重要的是，一抗选择。

c-Fos抗体：一抗在特异性、灵敏度和信噪比方面有所不同，这些特性影响您的实验结果。因此，Synaptic Systems旨在提供高特异性和一致性的c-Fos抗体，以支持科学研究和实验可重复性。由于单克隆抗体与多克隆抗体相比具有几个优点，Synaptic Systems开发了一种新的单克隆重组兔抗c-Fos抗体。

Synaptic Systems单克隆重组c-Fos抗体的优势：

抗体具有由两个重链和两个轻链组成的共同结构。重链和轻链都包含物种特异性的恒定区域和负责目标识别的可变序列（Davies和Metzger，1983）。

在来自定义的杂交瘤细胞系的单克隆抗体制剂中，所有单个抗体分子都是相同的，并且共享相同的抗原识别位点。相比之下，多克隆抗体，如兔c-Fos抗体226 003，由抗体分子的混合物组成，它们在目标识别序列上有所不同。一旦血清用完，就必须对新的动物进行免疫。获得的新血清包含新的c-Fos抗体混合物，具有新的特异性和亲和力特性，导致多克隆c-Fos抗体的批次间变异。

通过Synaptic Systems的单克隆重组兔c-Fos抗体226 008，Synaptic Systems永久性地解决了批次间变异的问题。Synaptic Systems对表现一贯良好的大鼠单克隆c-Fos抗体226 017的c-Fos目标识别域进行了测序，并将它们融合到兔IgG的恒定抗体区域。

这种高度定义的单克隆重组抗体可以在受控条件下在哺乳动物细胞中表达，作为一种无限资源，批次间变异最小。它在Synaptic Systems测试的标准应用中显示出优越的性能，并且等同于甚至优于Synaptic Systems最好的兔多克隆c-Fos批次。虽然多克隆兔抗c-Fos抗体226 003非常容易受到实验条件的变化影响（例如，IHC实验中的孵化温度会影响信号强度），但单克隆重组兔抗c-Fos抗体226 008在各种实验设置中都能产生稳健的染色结果，因此是您实验的最佳选择。

随着时间的推移，这种单克隆抗体将被用于许多不同的应用，收集到的所有信息将有助于更好地表征这种研究试剂。

与多克隆抗体相比，这些信息会累积并且永远不会丢失，使这种研究试剂成为您手中越来越有价值和可靠的工具。

新的组织透明技术，如CLARITY和iDISCO，为生物过程和结构提供了全新的见解。与Synaptic Systems的单克隆重组兔抗c-Fos抗体226 008结合使用，它们使Synaptic Systems能够在整个较大的区域内研究大脑中的途径。已经展示了如何通过使用CLARITY的修改版本和Synaptic Systems的c-Fos抗体226 008来标记记忆细胞，评估同一小鼠中重叠的细胞群体（Refaeli等人，2024）。

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