今日上班路过高架,发现路边的路灯挂上了红灯笼,一个路灯下一串红彤彤的灯笼,不由感叹2020就要就结束了,马上就要过年啦。很多学校的小伙伴已经放假回家,虽然放假很开心,但是呢也要关注各个地方的防疫政策,放假直接回家,哪也不要去瞎溜达,尽管那个地方目前是低风险的,咱们也不能掉以轻心。今日大寒,又遇腊八,寒冬腊月过,便是春之始。相信春天到来时,我们就可以踏春出游啦!
言归正传,我们的今天来聊聊Feulgen DNA倍性分析。Feulgen反应是非常经典的显示DNA的组织化学反应,虽然是1924年发明的(想想那个时候的中国人民正生活在水深火热之中,那一年国共开始第一次合作,孙中山组建北伐军,广州沙面工人罢工等等),至今这种方法仍是DNA定量测定主要染色方法之一。在病理学研究上,将组织进行冷冻切片、快速石蜡切片等制片后,运用图像分析系统及显微分光光度计对细胞DNA含量进行测定和分析,对判断病症的良恶性有重要的参考价值。
Feulgen染色程序的基础是使用盐酸水解,从DNA分子的脱氧核糖骨架上去除嘌呤。新暴露的脱氧核糖具有一个醛基,然后可以通过用Schiff试剂(在这种情况下,甲酚紫和硫酸的水溶液用于测试醛的存在)染色来识别。普通的Feulgen是用Schiff试剂与游离的醛基进行结合行成紫红色化合物,只要有DNA就呈现紫红色。产生的染色颜色数量与染色核中存在的DNA数量成正比。我们今天说的Blue Feulgen显示的结果确实蓝色的。反应机理可表示为:
2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3
Cat#DPK500:Blue Feulgen DNA Ploidy Analysis Staining Kit
Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色试剂盒是一种组织化学试剂盒,用于量化细胞中的核DNA含量。该试剂盒可用于各种类型的标本,从细胞离心机制备到福尔马林固定石蜡包埋组织切片。
Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色试剂盒组分:
蓝色Feulgen染色液2 x 500ml ;
脱色剂10管
冲洗试剂10瓶
储存:染色剂的瓶子可以反复打开,并应在2-8º C的温度下保存。在转换为希夫试剂后,染色剂应在15分钟内使用。脱色剂和冲洗剂的小瓶为一次性使用而设计,应在2-8ºC或18-25ºC下保存。
样本和试剂准备:该试剂盒针对不同的样本有不同的制样方法,均在说明书上有详细介绍,大家感兴趣欢迎查阅:https://www.scytek.com/productPDF/Specsheet/DPK500-IFUrev2.pdf。
染色结果,图左为细胞染色;图右为组织染色结果:
结果是不是与传统的红色结果是不是大不相同。虽然颜色不一样,但是原理却是一样的。
Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色试剂盒特点和优势:
独特的配方消除了染料沉淀,比传统的基于Feulgen试剂的试剂盒染色更干净。该染色试剂盒针对DNA Ploidy标本进行了优化,这些标本将被染色,然后在图像分析系统上进行扫描和查看。
注意事项:
从这个反应机理公式上看2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3,整个反应过程时会产生少量的SO2的,所以大家在实验过程中要做防护措施,戴好口罩,不用在实验区域吃东西喝水喝酒喝饮料,也不要抽烟!!还有就是不管做什么实验都要有一个良好的实验习惯,做完实验即使清理废弃物和擦拭桌面哟!
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