微生物(细菌，真菌&酵母)荧光染色及活力检测全套工具

1、酵母和真菌染色

用于酵母细胞染色的荧光染料和试剂盒，包括活性染料、组合染色试剂盒和细胞器染色剂。在多色显微镜或流式细胞术实验中结合这些染料可实现最大的实验多功能性。  

• 酵母活力染色

Biotium提供了一系列不同的荧光活力染料和试剂盒，以允许通过显微镜或流式细胞区分活酵母细胞和死酵母细胞（参见下面的活力PCR部分，了解通过qPCR检测活酵母）。  

• 酵母细胞器染色

我们的许多细胞器和细胞染色剂可用于对酵母细胞进行染色。我们还提供可以染色发芽酵母细胞壁和出芽痕的染色剂。  

更多介绍及产品详情请参见：

2、细菌荧光染色

对于细菌，我们提供荧光染料来染色活细胞、死细胞和革兰氏阳性细胞，在多色显微镜或流式细胞实验中结合这些染料可以同时评估多个参数。

• 细菌活细胞染色：

通常，可视化或检测样本中存在的所有细菌非常有用，无论其种类或代谢状态如何。为此，我们提供了一系列染料，这些染料通常可以染色所有细菌，包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。这些染料有多种颜色和区域可供选择：

• 荧光革兰氏染色：

传统的比色革兰氏染色方案非常费力，需要多达5种不同的溶液来染色细胞，包括有毒酒精和丙酮来使样品脱色，并且需要精确的时间安排。相比之下，小麦胚芽凝集素 (WGA) 已被证明与革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖层中的N-乙酰氨基葡萄糖特异性结合，并且可以用多种不同的荧光染料进行标记，用于一步荧光细胞标签。我们提供13种颜色选项的荧光WGA偶联物，以及组合革兰氏染色/活性试剂盒和 DNA 染料。

• 细菌活力染色

Biotium 提供一系列不同的荧光活力染料和试剂盒，以允许通过显微镜或流式细胞术区分活细胞和死细胞（参见下面的活力PCR 部分, 了解通过qPCR检测活细菌）

3、活力PCR (Viability PCR，v-PCR)：通过PCR定量测定微生物活性

Viability PCR 是一种灵敏、快速检测活微生物的强大技术。与耗时的培养方法不同，qPCR 是一种快速且灵敏的检测方法。然而，正常的 qPCR 不能区分活细胞和死细胞。通过使用PMAxx?或PMA的v-PCR，您可以获得PCR的速度、灵敏度和特异性，以及对细胞活性水平进行量化。由于不需要培养，您甚至可以检测活的但不可培养的细菌 (VBNC) 。v-PCR技术不仅可以应用于细菌，还可以应用于酵母、病毒、真核生物和古细菌等其他生物。  

• v-PCR 是如何工作的？

下面的信息图显示了v-PCR的作用机制，PMAxx?和PMA是对DNA具有高亲和力的光反应染料，染料嵌入dsDNA并在强烈的可见光下形成共价键。该反应通过在纯化过程中去除修饰的DNA和抑制DNA聚合酶的模板扩增的组合来抑制修饰的DNA的PCR 扩增。因为染料是细胞膜不渗透性的，所以当用染料处理含有活细菌和死细菌的样品时，只有细胞膜受损的死细菌的DNA才能够被修饰，在后续的qPCR反应中，死细胞DNA将表现出延迟扩增同时比活细胞显示出更高的Ct值。

• 用于活性PCR的PMA和PMAxx?染料

PMA是Biotium为v-PCR开发的原始染料，它已在多种细菌菌株以及酵母和病毒中得到验证（参见PMA引用文献）。然而，虽然PMA通常可通过qPCR有效区分活细菌和死细菌，但它并不能完全消除死细胞 DNA 中的 PCR 产物。这可能会产生假阳性结果。 

PMAxx?由Biotium科学家设计，旨在成为PMA的卓越替代品。PMAxx?在消除死细胞DNA的PCR扩增方面更有效，因此可以最好地区分活细菌和死细菌。  

更多介绍及产品详情请参见：

Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司，公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多，包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。    

目前，Biotium已将其许多专利技术授权给一些主要的国际生物技术公司，包括安捷伦、BD生物科学、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。