百余科学家呼吁,Nature发文,Abnova重组抗体来袭
------抗体可靠性这波稳了!
图片来源:Pete Ellis/drawgood.com [1]
科研界的抗体困境
如今,科研者仍然不断遭遇抗体的悲剧。最常见的是:购买的用于检测蛋白X的抗体优先与蛋白Y结合(甚至可能完全不与X结合);可重复性差,用新抗体重复以前的实验,发现结果无法重复。一个好项目因此搁浅,抗体的不可靠性问题非常让人警醒。
几十年来,研究人员一直使用多克隆抗体。它们是通过将靶标(通常是蛋白质)注入动物体内,并利用得到的血清作为抗体来源而产生的。不过,一种多克隆试剂中只有0.5%~5%的抗体能结合其既定的靶标。同时,抗体的功能性每个批次都不相同,在对动物进行免疫处理时,即使是同一种动物,永远不会产生完全相同的抗体组合。即使是单克隆抗体并非没有任何问题,杂交瘤细胞系会相继死亡,并丧失其抗体基因,或者当脱离冷冻条件时,它们便不再生长。这意味着,某种特定单克隆抗体的来源可能会永久失去。更重要的是,此类抗体可能和不止一种靶标结合,或许因为它们实际上是拥有多种特异性的抗体组合,抑或只是因为它们能结合很多蛋白质。
为什么选择重组抗体:
不同于传统的单克隆抗体,因为它们的制备不需要动物。相反,通过检测产生该抗体的基因序列(通过对动物的免疫细胞进行测序、或自己设定序列,检测产生的蛋白是否符合目标蛋白);再将该基因插入到合适的细胞株中,从而产生抗体。由于抗体是确定的,即使原始细胞株死亡或发生突变,也能通过基因插入,产生需要的细胞株。
谁能提供可靠的重组抗体:
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参考文献:
[1] Bradbury A, Pluckthun A. Standardize antibodies used in research: to save millions of dollars and dramatically improve reproducibility, protein-binding reagents must be defined by their sequences and produced as recombinant proteins, say Andrew Bradbury, Andreas Pluckthun and 110 co-signatories[J]. Nature, 2015, 518(7537): 27-30.
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