Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒化验原理&文献参考

聚ADP-核糖基化（Poly ADP-ribosylation，标准杆数）是真核细胞中的一种翻译后修饰，可调节修饰后蛋白质的活性，并将其与其他蛋白质结合他们与其他人的互动。这种修饰是由聚ADP核糖聚合酶介导的（PARPs）和ADP核糖基转移酶2（ART2），其使用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）作为基底ADP-核糖基化可被PAR降解酶如聚（ADP-核糖）逆转糖水解酶（PARG）和ADP核糖水解酶3（ARH3）（图1）。

聚ADP核糖基化参与不同的生物学功能，如致癌、分化以及细胞死亡。ADP核糖基化活性的失调与诸如癌症、病毒感染和神经变性等疾病。ADPribosation最受研究的作用之一是产生标准杆数链以应对DNA损伤。使用这些标准杆数链募集修复蛋白和染色质重塑因子。因此，DNA修复过程增强。这可能是肿瘤逃避细胞凋亡的一种机制。最近PARP家族成员在治疗某些癌症方面表现出了希望，有三种药物可在美国和欧洲买到，主要用于治疗BRCA突变卵巢癌症

图1：聚ADP核糖基化反应。PARP酶水解NAD+并将ADPribose基团（ADPr）转移到蛋白质受体上。几个相互连接的ADPr单元生成一个长带负电的聚合物。这些聚合物被PARG和ARH3降解。

艾美捷Cell Biolabs Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒#XDN-5114是一种为快速检测而开发的酶免疫测定试剂盒以及细胞或组织样本中标准杆数水平的定量。通过比较未知样品的吸光度和已知标准曲线的吸光度，确定未知样品中标准杆数的数量。该套件有一个每个试剂盒提供足够的试剂进行多达96次测定，包括标准曲线和未知样本。

Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒化验原理：

Poly（ADP-核糖）ELISA试剂盒是一种夹心ELISA试剂，用于定量测定标准杆数。首先将样品或标准杆数标准品添加到单克隆抗PAR抗体涂层微孔板中。在短暂培养后，添加抗PAR多克隆检测抗体，然后添加HRP结合的第二抗体。添加基质后，发生比色反应用比色板读数器测量。未知样品中的标准杆数含量由以下公式确定将此吸光度与标准杆数聚合物标准曲线中的吸光度进行比较。

Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒组分：

箱子1（在室温下装运）

1.96孔蛋白质结合板（零件号231001）：一个带孔96孔板

2.抗聚（ADP核糖）涂层抗体（零件号51146C）：一个20?L小瓶

3.抗聚ADP核糖检测抗体（零件号51142C）：一个15?L小瓶

4.第二抗体，HRP缀合物（1000X）（零件号51143C）：一个15?L小瓶

5.含量测定稀释剂（零件号310804）：一瓶50 mL

6.10X洗涤缓冲液（零件号310806）：一瓶100毫升

7.基质溶液（零件号310807）：一个12 mL琥珀色瓶子

8.停止溶液（零件号310808）：一瓶12 mL

9.100X PARP抑制剂（零件号51145C）：一瓶3 mL琥珀色3-氨基苯甲酰胺（3-AB）

在二甲基亚砜中为100 mg/mL（735 mM）

箱子2（蓝色冰袋装运）

1.聚（ADP核糖）标准品（零件号51144D）：一个10?L小瓶，2.5?M。

Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒文献参考：

1. Miwa, M. and Masutani, M. (2017). PolyADP-ribosylation and cancer. Cancer Sci. 98(10):1528-

35.

2. Lüscher, B. et al. (2018). ADP-Ribosylation, a Multifaceted Posttranslational Modification

Involved in the Control of Cell Physiology in Health and Disease. Chem Rev. 118(3):1092-1136.

3. Martin-Hernandez, K. et al. (2017). Expanding functions of ADP-ribosylation in the maintenance

of genome integrity. Semin Cell Dev Biol. 63:92-101.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是著名的细胞学试剂品牌，作为最前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供最好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。