VitroCol? 是一种 3 mg/ml 的 I 型人去端胶原溶液,用于 2D 和 3D 细胞培养,或作为胶原标准品。VitroCol 胶原蛋白由人类新生儿成纤维细胞自然分泌,然后经过加工和纯化以产生天然产生的人类胶原蛋白。
VitroCol胶?原蛋白由人新生儿成纤维细胞自然分泌。人成纤维细胞在合适的条件下培养,使成纤维细胞能够自然有效地分泌细胞外基质。然后对细胞外基质进行处理和纯化,以产生天然产生的人类胶原蛋白。
VitroCol? 含有大约 97% 的 I 型人类胶原蛋白,其余由 III 型胶原蛋白组成。VitroCol? 以大约 3 mg/ml 的浓度提供。每个特定批次的浓度在购买每种产品时提供的分析证书上提供。VitroCol? 是可溶性去端胶原蛋白,溶于 0.01 N HCI 中,因此 pH 值为 2。
VitroCol? 特别适用于人类细胞培养系统,用于表面包衣、提供培养细胞薄层的制备或用作固体凝胶。VitroCol? 人胶原蛋白采用用户友好的包装,便于使用和储存。VitroCol? 经过无菌过滤,以即用型溶液形式提供。
艾美捷VitroCol,人去端胶原溶液(ABM-5007-20ML)参数:
参数、测试和方法 VitroCol I? 型胶原蛋白 #5007
灭菌方法 过滤
提取方法 酶 - atelocollagen
形式 溶液
包装尺寸 20 毫升、100 毫升
储存温度 2-10°摄氏度
保质期 自收到之日起至少 6 个月
胶原蛋白浓度 - 缩二脲
2.9-3.2毫克/毫升
胶原蛋白纯度 - 银染
>99%
酸碱度 1.9-2.1
动力学凝胶测试(分钟) <40
凝胶形成管测试(分钟) <40
原纤维生成(吸光度单位) >0.5
电泳图案 - 考马斯蓝
特征:
无菌性 - USP 改良 无增长
内毒素 - 鲎剂 <5.0 欧标/毫升
渗透压 (mOsmo H2O/kg) <35
细胞附着检测 通过
源 人新生儿成纤维细胞
水凝胶杨氏模量 E (Pa) 特征
涂装程序:
注意: 使用这些建议作为指南,以确定培养系统的合适的包被条件。
根据需要将所需体积的胶原蛋白溶液从瓶子转移到稀释容器中。使用无菌 0.01 N HCl 溶液稀释至所需浓度。典型的工作浓度范围为 50 至 100 ug/ml。
向培养表面加入适量稀释的 VitroCol? 材料。
在室温下孵育,盖上盖子,1-2小时。吸出任何剩余的材料。或者,在室温下孵育直至表面干燥。
用无菌介质或 PBS 仔细冲洗涂层表面,避免划伤表面。
涂层表面可供使用。如果保持无菌性,它们也可以储存在 2-8°C 的潮湿或风干下。
3-D凝胶制备程序:
将 1 份冷冻的 10X PBS 或 10X 培养基缓慢加入 8 份冷冻胶原蛋白溶液中,轻轻旋转。
使用无菌 0.1M NaOH 将混合物的 pH 值调节至 7.0-7.5。仔细监测pH值调节(pH计、酚红或pH试纸)
用无菌水将最终体积调整至总共 10 份。
为防止凝胶化,请将混合物温度保持在 2 – 10°C。
要形成凝胶,加热至37°C。 等待大约 90 到 120 分钟以形成凝胶。
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