G蛋白偶联受体(GPCRs),是细胞表面的Z大受体家族之一,广泛参与调节细胞对外界信号的响应。它们在多种生理过程中发挥着关键作用,包括视觉、嗅觉、神经传递、激素响应和免疫功能等。GPCR的异常功能与多种疾病有关,因此,GPCR检测在药物发现和疾病诊断中具有极其重要的意义。
Screen Gs偶联GPCR以监测荧光板读取器或成像系统上cAMP的增加。标准库存带有CMV启动子。
在您选择的活细胞中实时测量循环AMP信号。绿色荧光的增加表明cAMP的产生增加。cADDis经基因编码并包装在BacMam病毒载体中,可轻松转导到多种细胞类型中,包括原代和iPSC衍生的细胞系。只需将cADDis添加到你的细胞中,第二天就可以在标准荧光显微镜和自动读板器上测量强大的信号。
Montana Molecular-GPCR检测试剂盒(#U0200G)中包含的材料:
绿色增强型cADDis cAMP传感器BacMam
500 mM的丁酸钠,溶于H2O
带有核红标记的β2肾上腺素受体BacMam
10 mM的异丙肾上腺素,溶于10 mM的盐酸中
GPCR检测参考文献:
S. Hoare, et al. Quantifying the Kinetics of Signaling and Arrestin Recruitment by Nervous System G-Protein Coupled Receptors. Frontiers in Cellular Neuroscience. January 2022.
S. Hoare, T. Hughes. Biosensor Assays for Measuring the Kinetics of G-Protein and Arrestin-Mediated Signaling in Live Cells. The Assay Guidance Manual. September 2021.
S. Hoare, et al. Analyzing kinetic signaling data for G-protein-coupled receptors. Nature Scientific Reports. July 2020.
S. Hoare, et al. A kinetic method for measuring agonist efficacy and ligand bias using high resolution biosensors and a kinetic data analysis framework. Nature Scientific Reports. Feb 2020.
GPCR检测技术:
荧光共振能量转移(FRET)
FRET是一种利用两个荧光分子能量转移来检测蛋白质间相互作用的技术。在GPCR检测中,通过标记GPCR与其下游效应分子,可以实时监测受体激活后的构象变化。
细胞膜片钳技术
细胞膜片钳技术可以用来测量细胞膜上的离子通道电流变化,从而评估GPCR激活后对离子通道的影响。
放射性配体结合分析
通过使用放射性标记的配体,可以检测GPCR与其配体的结合亲和力,是一种传统的GPCR功能检测方法。
酶联免疫吸附测定(ELISA)
ELISA技术可以用来检测GPCR激活后释放的细胞因子或酶的量,从而间接反映GPCR的活性。
GPCR检测相关产品:
#U0600R Red GECO Ca2+ Assay Kit
#D0400R Red PIP2 Assay Kit
#U0601R Mitochondrial-targeted Red GECO Assay Kit
#D0241G Green Membrane-Targeted fS15 cADDis cAMP
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