SouthernBiotech丨支原体检测试剂盒，专业检测细胞培养物中潜在的支原体污染

SouthernBiotech支原体检测试剂盒专为检测细胞培养物中潜在的支原体污染而设计。该试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）扩增支原体内保守的16S核糖体RNA编码区基因组，从而提供了一种广泛、高灵敏度和高效的检测方法。精心确定的底漆顺序包括支原体的三个属（支原体、Acholeplasma和脲原体），使试剂盒能够检测95%以上的潜在细胞文化感染。支原体检测试剂盒中的PCR技术快速（结果通常在3小时内获得）且易于使用。工具包它也是高度敏感的，可以在100?L的测试样品上清液中检测到少至2-5femtogram的支原体DNA。真核生物试剂盒不扩增细胞培养上清液中的细菌DNA。

感染支原体的样本细胞系将在琼脂糖凝胶上产生~448 bp至~611 bp的PCR产物，具体取决于存在的支原体类型。加入阳性对照（M.orale，503 bp）以验证PCR扩增过程具有以及确认测试样品中获得的PCR产物的大小。还提供了内部控制，以消除与PCR抑制剂相关的潜在假阴性。

艾美捷SouthernBiotech丨支原体检测试剂盒用户指南：

? 引物组和核苷酸（冻干）- 蓝色瓶盖

引物/核苷酸混合物（包括dATP、dCTP、dGTP和dUTP的脱氧核苷酸三磷酸）

? 无菌PCR 10X反应缓冲液（500 μL）- 白色瓶盖

100 mM Tris-HCl，pH 8.5

750 mM KCl

30 mM MgCl2

? 阳性对照DNA（冻干）- 黄色瓶盖

来自M. orale的非感染性PCR产物

产生一个503 bp的条带

? 内部对照DNA（冻干）- 绿色瓶盖

包含特定支原体引物序列的非感染性质粒DNA

产生一个270 bp的条带

SouthernBiotech丨支原体检测试剂盒组件：

引物组和核苷酸（冻干）-蓝色帽

无菌PCR 10X反应缓冲液（500μL）-白色盖子

阳性对照DNA（冻干）-黄色帽

内部控制DNA（冻干）-绿帽

Lane 1 E. coli Genomic DNA

Lane 2 Hybridoma Cell DNA

Lane 3 Negative Control (H20)

Lane 4 Positive Control

Lane 5 Inhibited Sample

Lane 7 Weakly Contaminated Sample

Lane 8 100 bp DNA Ladder

Lane 6 Strongly Contaminated Sample

所需材料：

? 热循环仪

? Taq DNA聚合酶

以下协议已针对热启动Taq DNA聚合酶进行了优化

不建议使用其他DNA聚合酶

? DNA梯度

? PCR反应管

? 无DNase水

支原体检测试剂盒参考文献：

1. Lamb SA, Rahman MM, McFadden G. Recombinant myxoma virus lacking all poxvirus ankyrin-repeat proteins stimulates multiple cellular anti-viral pathways and exhibits a severe

decrease in virulence. Virology. 2014;464-5:134-45.

2. Frampton GM, Ali SM, Rosenzweig M, Chmielecki J, Lu X, Bauer TM, et al. Activation of MET via diverse exon 14 splicing alterations occurs in multiple tumor types and confers clinical

sensitivity to MET inhibitors. Cancer Discov. 2015;5:850-9.

3. Modur V, Joshi P, Nie D, Robbins KT, Khan AU, Rao K. CD24 expression may play a role as a predictive indicator and a modulator of cisplatin treatment response in head and neck

squamous cellular carcinoma. PLoS One. 2016;11(6):e0156651.

4. Campos-Gomez J, Ahmad F, Rodriguez E, Saeed MF. A novel cell-based assay to measure activity of Venezuelan equine encephalitis virus nsP2 protease. Virology. 2016;496:77-89.

5. Wang X, Shaw DK, Hammond HL, Sutterwala FS, Rayamajhi M, Shirey KA, et al. The prostaglandin E2-EP3 receptor axis regulates Anaplasma phagocytophilum-mediated NLRC4

inflammasome activation. PLoS Pathog. 2016;12(8):e1005803.

SouthernBiotech 致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。  同时，SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体，其中包括：荧光素和酶标记物，低内毒素/不含叠氮化物（LE/AF）制剂，F(ab)和 F(ab')2片段化抗体，此外还有纯化的免疫球蛋白、血清以及细胞外基质蛋白等产品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。