胰凝乳蛋白酶优先催化涉及酪氨酸,苯丙氨酸和色氨酸的L-异构体的肽键的水解。它还容易作用于敏感氨基酸的酰胺和酯。胰凝乳蛋白酶催化亮酰基、蛋酰基、天冬酰胺和谷氨酰残基键的水解。
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产品名称 | 货号 | 详情 |
胰凝乳蛋白酶TLCK Treated | WBC-LS001430 | 查看 |
测定方案:
方法 根据Hummel(1959)通过测量由苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯水解引起的256nm处吸光度的增加来确定反应速度。在指定条件下,一个单位在pH 7.8和25°C下每分钟水解一微摩尔苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)
试剂
0.08 M Tris?HCl 缓冲液,pH 7.8,含 0.1 M 氯化钙 0.00107 M 苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯 (BTEE) 在 50% w/w 甲醇中(将 63 ml 无水甲醇添加到 50 ml 试剂级水中) 0.001 N HCl
酶
将酶以一mg / ml溶解在0.001N HCl中,在0.001N HCl中稀释至10-30μg/ ml用于测定。
程序
将分光光度计调整至 256 nm 和 25°C。 移液到比色皿中,如下所示:
0.08 M Tris?HCl 缓冲液,pH 7.8,含 0.1 M 氯化钙2 | 1.5毫升 |
0.00107 米 BTEE | 1.4毫升 |
在分光光度计中在25°C孵育4-5分钟以达到温度平衡并记录空白率(如果有)。加入0.1ml适当稀释的酶,并在256nm处记录吸光度增加4-5分钟。计算 ΔA256/分钟从曲线的初始线性部分开始。
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胰凝乳蛋白酶TLCK Treated部分引用文献:
Abdullah, M. , Siddiqui, A. , Hill, J. and Davies, R.
The Purification of alpha-Antichymotrypsin from Human Serum Using DNA-Cellulose Chromatography , Arch Biochem Biophys 225 , 306 , 1983
Adelson, J. and Rothman, S.
Selective Pancreatic Enzyme Secretion Due to a New Peptide Called Chymodenin , Science 183 , 1087 , 1974
Adlercreutz, P. and Clapes, P.
Catalytic Properties of alpha-Chymotrypsin in Organic Media , Biomed Biochim Acta 50 , S55 , 1991
酶是Worthington的主要产品线。从技术上讲,Worthington实际上并不制造酶,而是从各种动植物组织和各种微生物来源(如细菌、真菌和霉菌)中提取酶。根据该酶在材料中的普遍性选择特定酶的起始材料。例如,一种功能涉及使肌肉工作的酶将主要存在于肌肉组织中,因此起始材料可能是兔肌肉或猪心;参与发酵的酶最好在酵母中找到。 Worthington使用的一些动物组织包括牛胰腺、猪肾、牛眼、马肝、兔肌肉、牛肝、猪心、马血和小牛肠。各种蛋白质也从辣根、红薯、杏仁和美洲商陆中提取。一些产品是从大肠杆菌、几种梭状芽胞杆菌和各种其它细菌中分离出来的。还使用酵母、蘑菇、全脂牛奶和鸡蛋等。
Worthington是一家通过的ISO9001认证的家族企业。主要生产用于生物技术和生命科学研究,诊断,生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶,蛋白质,核酸和试剂盒。作为生命科学领域知名的酶类供应商,以及细胞分离酶的专家级公司,其核心酶产品包括:胶原蛋白酶,脱氧核糖核酸酶I,弹性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
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