TopoGEN-线性kDNA，II型酶的理想底物

由于部分纯化的组分中存在拓扑异构酶I，基于超螺旋DNA弛豫的使用粗提取物进行拓扑异肽酶II活性的测定可能会很复杂。污染核酸酶活性（由于Mg++）会降解或划伤超螺旋底物，从而产生额外的并发症。这些问题可以通过使用由昆虫Crithidia fasiculata锥虫动质体制备的链状DNA底物来避免。KDNA是互锁的DNA微环（大多为2.5kb）的集合，形成了高分子量的超大网络。因此，这些网络无法进入琼脂糖凝胶。当与拓扑异构酶II一起孵育时，它会使DNA参与双链断裂和重组循环，从而有效地释放（脱链）微环DNA。由于尺寸小，脱链的微环迅速进入凝胶。拓扑异构酶I不会发生这种反应。TopoGEN修改了Miller等人描述的原始凝胶系统，以允许使用kDNA对活性进行额外区分。

艾美捷TopoGEN-线性kDNA：

编号：TG2018-1

分类：DNA底物

标签：kDNA标记，线性kDNA，线性kDNA标记

kDNA是II型酶的理想底物，无论是原核生物还是真核生物。它对于断裂和重新连接DNA双链的拓扑异构酶具有高度特异性；这定义了II型（双链DNA）的作用机制。确保kDNA纯净、纯化至已知浓度、无核酸酶且验证可与top2酶一起工作至关重要。

线性kDNA质量控制测试：

对于连环kDNA底物，至少90%的DNA将保留在1%琼脂糖凝胶的孔中。

每批kDNA的解链都经过纯化的拓扑异构酶II测试。

该标记在常温下运输，应储存在4°C。

TopoGEN-线性kDNA文献参考：

Miller et al., J. Biol. Chem. 256:9334-9339 (1981)

Muller et al., Biochem. 27:8369-8379, 1988

Muller et al., Nuc. Acid. Res. 17:9499, 1989

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