TopoGEN-Kinetoplast DNA（kDNA）：拓扑异构酶II活性测定的关键生物标志物

Kinetoplast DNA（kDNA）是拓扑异构酶II测定的理想底物，因为它对II型反应机制具有特异性。研究人员甚至可以在存在大量过量拓扑异构酶I的情况下检测II型酶。因此，kDNA可以很好地量化粗细胞提取物中的II型活性，这些提取物经常被拓扑异酶I超载。kDNA与人类Top 2a和b以及原核酶，如DNA Gyrase或拓扑异异构酶IV，都表现得非常好。这种底物与我们的Topo II检测试剂盒、Topo II药物筛选试剂盒和Gyrase检测试剂盒包装在一起。

艾美捷TopoGEN-Kinetoplast DNA（kDNA）：

编号：TG2013

分类：DNA底物

标签：DNA旋转酶、kDNA、kDNA底物、动力虫DNA、拓扑异构酶2

与其他DNA底物的区别：

基于超螺旋DNA松弛的粗提物中拓扑异构酶II活性的测定可能会因为部分纯化分数中存在拓扑异构酶I而变得复杂。由于Mg++的存在，污染的核酸酶活性可能会导致超螺旋底物降解或产生切口，这会引起额外的复杂性。通过使用从昆虫锥虫属克氏锥虫的动粒中制备的kDNA底物，可以避免这些问题。动粒DNA是由相互锁定的DNA小圆圈（大部分为2.5 kb）聚集而成的，形成极高分子量的大型网络。因此，这些网络无法进入琼脂糖凝胶。在与人类拓扑异构酶II alpha孵育后，该酶通过双链DNA断裂和重新连接循环，有效地释放（解链）小圆圈DNA。解链后的小圆圈由于尺寸小，会迅速进入凝胶。这种反应是II型酶特有的，不会检测到拓扑异构酶I。TopoGEN的kDNA经过认证，可与我们所有的Top2酶一起使用，但适用于人类/动物细胞系的粗提物。

对于连环kDNA底物，至少90%的DNA将保留在1%琼脂糖凝胶的孔中。

kDNA储存在10 mM Tris-Cl（pH 7.5）和1 mM EDTA中，浓度如产品说明所示。

kDNA应储存在4°C；然而，长期储存在-20°C也是可以接受的。底物通常在常温下运输。

TopoGEN-Kinetoplast DNA（kDNA）文献参考：

Ege Gok, Naz Unal, Burcin Gungor, Gulderen Karakus, Savas Kaya, Pakize Canturk and Konstantin P. Katin: Evaluation of the Anticancer and Biological Activities of Istaroxime via Ex Vivo Analyses, Molecular Docking and Conceptual Density Functional Theory Computations. Molecules 2023, 28(22), 7458;

Phillips JW, Goetz MA, Smith SK, Zink DL, Polishook J, Onishi R, Salowe S, Wiltsie J, Allocco J, Sigmund J, Dorso K, Lee S, Skwish S, de la Cruz M, Martin J, Vicente F, Genilloud O, Lu J, Painter RE, Young K, Overbye K, Donald RGK, Singh SB: Discovery of Kibdelomycin, A Potent New Class of Bacterial Type II Topoisomerase Inhibitor by Chemical-Genetic Profiling in Staphylococcus aureus.  Cell Chemistry and Biology 2011, 18: 955-965.  doi: 10.1016/j.chembiol.2011.06.011.

艾美捷科技是TopoGEN的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。