TopoGEN 高载量人拓扑异构酶I高载量试剂盒：优化药物筛选与细胞机制研究工具

该试剂盒旨在让客户筛选阻断人类拓扑异构酶I（topo I）催化活性的试剂（药物、天然产物、小分子、合成物）。使用高化学计量比的topo I:DNA诱导切割复合物，而不需要使用topo I毒物（喜树碱），这有助于检测topo I的催化抑制剂。该测定（见参考文献1）基于拓扑异构酶I以协同方式作用于DNA模板的发现，因此它倾向于显示聚集活性（在邻近位点，见参考文献3）；因此，在酶与DNA的高比率下，在没有喜树碱及其各种同系物等拓扑异构酶I毒素的情况下，相对容易检测到拓扑异肽酶I的刻痕。

作为TopoGEN在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐TopoGEN热销产品人拓扑异构酶I高载量试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

人拓扑异构酶I高载量试剂盒：

SKU：TG1017

类别：药物筛选试剂盒

标签：top1, 拓扑异构酶1检测，拓扑异构酶1

内容：

1. pHOT1 DNA，超螺旋底物。浓度为0.25微克/毫升（100微升TE缓冲液中含有25微克pHOT1 DNA，10毫摩尔Tris-HCl，pH7.5，1毫摩尔EDTA）。

2. 标记DNA，松弛型pHOT1；在1倍凝胶加载缓冲液中浓度为0.05微克/微升（50微升，作为标记物加载2微升）。

3. 拓扑异构酶I反应缓冲液（10倍TE；300微升）TE缓冲液（1倍）是10毫摩尔Tris-HCl pH 7.9，1毫摩尔EDTA。

4. 10%十二烷基硫酸钠（300微升）：用于终止反应，使用0.1体积（最终浓度为1%）。

5. 10倍凝胶加载缓冲液（300微升）：含有0.25%的溴酚蓝，50%的甘油，反应中使用0.1体积。

6. 蛋白酶K（500微升）浓度为0.5毫克/毫升。这是蛋白酶K的10倍储备液。

7. 提供的纯化人类拓扑异构酶I浓度为25单位/微升（20微升）。对于目录TG1017-1，总共包含500单位；对于目录TG1017-2，总共包含1000单位。

试剂盒将在干冰上运输。收到后，DNA应存放在4°C，缓冲液和酶应存放在-20°C。避免质粒频繁冻融循环，因为这可能导致DNA断裂和酶失活。

文献参考：

1.  Akerman, K., Fagenson, A., Cyril, V., Taylor, M., Muller, M, Akerman, M., and Munro O. (2014) Gold(III) macrocycles: nucleotide-specific unconventional catalytic inhibitors of human topoisomerase I. (2014) JACS: 136:5670-5682

https://dl.dropboxusercontent.com/u/6593368/ja412350f_s.pdf

2.  Mao, Y., Mehl, I., and Muller, M.T. (2002)  Nuclear and Nucleolar Localization by the N-terminal Domain of DNA Topoisomerase I.  Proc. Natl  Acad. Sci., USA 99: 1235-1240

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Proc.+Natl++Acad.+Sci.%2C+USA+99%3A+1235-1240

3.  Mao, Y. , Okada, S., Chang, L. and Muller, M.T.p53 Dependence of Topoisomerase I Recruitment in vivo (2000)  Cancer Research 60: 4538-4543

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Cancer+Research+60%3A+4538-4543

美国TopoGEN创立于1991年, 专业提供拓扑异构酶试剂和分析试剂盒，他们的药物筛选试剂盒可用于鉴定拓扑异构酶靶向分子，用于癌症化疗和抗菌应用。TopoGEN还可提供检测和定量原核（DNA回旋酶，拓扑异构酶IV）和真核拓扑异构酶（拓扑异构酶I，IIa，IIb，III）的检测试剂盒，以及全系列的 DNA 底物和 DNA 切割靶标、拓扑异构酶抑制剂、拓扑异构酶抗体和试剂盒补充试剂，DNA修复的相关系列产品也是他们产品的特色产品。  

作为TopoGEN在中国的代理商，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的TopoGEN以及客户订制化服务。