Tyrosyl-DNA磷酸二酯酶-2(TDP2)的功能是通过在DNA断裂部位加工5′-阻断蛋白(topo II)来去除被捕获的拓扑异构酶II/DNA复合物(图1)。就生理相关性而言,TDP2似乎具有多种作用,远远超出了II型拓扑异构酶损伤的修复和随后的DNA修复。这与Top1/DNA修复蛋白TDP1有很大不同。TDP1和2之间也存在许多机制差异(见Pommier的评论,PMID 24856239)。在人类中,TDP2应被视为一种多功能酶,在TNF和MAPK/JNK/p38通路中发挥作用。与APE1和Mg++/Mn++依赖性磷酸二酯酶超家族有一些相似之处,有证据表明,皮核糖核酸病毒将TDP2作为VPg非连接酶功能。鉴于拓扑异构酶II在抗癌治疗中的关键作用,抑制TDP2的药物可能被证明可用于与阿霉素和依托泊苷(VP16)等已建立的界面毒物(IFP)的联合治疗。由于这种想法,已经有了一些TDP2候选抑制剂。TDP2特异性识别5'-磷酸酪氨酸键,合成底物可用于HTS和药物发现(例如,4-硝基苯基膦酸乙酯或放射性标记的寡核苷酸)。虽然这些合成或半合成底物可用于高通量筛选,但抑制剂需要在真正的Top2/DNA共价加合物上进行测试和验证。因此,TopoGEN开发了一种真正的Top2/DNA底物。
TopoGEN提供捕获的、未经处理的Top2/kDNA共价复合物,可以有效地用作TDP2底物(检测大纲见图2)。由于存在共价结合的蛋白质,除非添加蛋白酶K(降解并释放大部分变性Top2a)或TDP2反应释放被捕获的蛋白质,否则无法检测到线性CC复合物(图2,左泳道)。
艾美捷TopoGEN-人TDP-2检测试剂盒:
编号:TG1005
分类:TPD2
标签:人类Tdp2测定,Tdp2,酪氨酸DNA磷酸二酯酶2
人类TDP2测定试剂盒包含了在易制备的1%琼脂糖凝胶中定量TDP2活性所需的试剂。由于kDNA是一个如此大的底物,凝胶可以快速运行(在100-250伏下不到10分钟),从而提高通量。试剂盒中包含标记物,以便明确解读结果。通过使用如ImageJ之类的共享软件扫描凝胶,结果可以轻松量化。
试剂盒可以在常温下运输或在冰上(干冰或湿冰)运输。收到后,DNA应储存在4°C,缓冲液储存在-20°C。避免频繁的冻融循环,因为这可能导致DNA断裂。
艾美捷科技是TopoGEN的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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