T7 RNA聚合酶适用于合成标记/未标记的高特异性 RNA 探针

T7 RNA聚合酶（T7 RNA Polymerase）是一种 RNA聚合酶，分子量约99kDa。专门催化5'→3'方向的 RNA形成过程。T7RNA聚合酶具有高度启动子专一性，且只会转录T7 噬菌体中位于T7启动子下游的的DNA或DNA复制品。

此酵素在合成RNA的过程中，需要DNA模板与 镁离子（Mg）作为 辅因子。 牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）及 精胺（spermidine）对此酵素具促进效果。与细菌的RNA聚合酶的差异之一，在于T7RNA聚合酶不受 抗生素 利福平（rifampicin）抑制。

艾美捷T7 RNA聚合酶（#C-BSM0124）适用范围:

1. 合成单链 RNA，包括 mRNA，siRNA，gRNA 等各类 RNA 的前体。

2. 合成标记或未标记的高特异性 RNA 探针。

3. 利用帽子类似物合成加帽的 mRNA。

T7 RNA聚合酶可分为：常规型和耐热型。常规型T7 RNA聚合酶可在37℃对模板进行高效体外转录，而耐热型T7 RNA聚合酶可在更高的温度下（37-52℃）进行体外转录。

T7 RNA聚合酶使用方法：

推荐的反应条件：

在37°C下培养1小时。如果转录物长度小于300nt，反应时间可以延长至2-16小时。反应结束后，在上述20μl反应混合物中加入1μl双脱氧核糖核酸酶，并在37°C下孵育15分钟以移动DNA模板

备注：

1.模板DNA的纯度对于体外转录至关重要。在质粒DNA提取过程中引入的RNase A残基会显著影响转录RNA的质量。建议使用OD260/280比例为1.8-2.0的高纯度RNase游离质粒。

2.模板DNA可以通过线性化的环状质粒或PCR获得。模板DNA的上游区域应包含T7启动子序列，下游区域应具有钝端或编码链上的5'突出部分。

3.为了您的安全和健康，请在进行实验时穿戴实验服、一次性手套和口罩。

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