BMA Biomedicals 应用--解析：《骨髓源性细胞向肾小球系膜细胞分化的潜力》

解析文章：《The Potential of Bone Marrow-Derived Cells to Differentiate to Glomerular Mesangial Cells》

链接： https://journals.lww.com/jasn/fulltext/2001/07000/the_potential_of_bone_marrow_derived_cells_to.9.aspx

一、背景

骨髓干细胞（BMC）的分化潜力：

骨髓干细胞传统上被认为主要能分化为造血系和血管间充质细胞系，但关于其是否能分化为肾小球细胞的研究较少。一些肾小球疾病的根本发病机制可能与骨髓干细胞的异常有关，这一发现为通过骨髓移植（BMT）治疗相关疾病提供了理论基础。

研究目的：

探讨骨髓干细胞是否有可能分化为肾小球系膜细胞，进而为肾小球疾病的治疗提供新的思路和方法。

二、 方法

实验动物与分组：

使用同基因C57BL/6j（B6）小鼠作为受体，转基因表达绿色荧光蛋白（GFP）的B6小鼠作为供体。受体小鼠经过致死剂量的全身照射后，移植来自供体小鼠的骨髓干细胞。

骨髓移植与细胞处理：

供体小鼠的骨髓干细胞在移植前进行T细胞清除处理，并通过尾静脉注射到受体小鼠体内。受体小鼠在移植后不同时间点（2周、4周、8周、24周）进行肾脏组织学分析和流式细胞术检测。

组织学与免疫组化分析：

肾脏组织经过固定、包埋、切片后，进行PAS染色和免疫组化染色，检测GFP阳性细胞在肾小球内的分布和类型。

使用特异性抗体（如抗desmin抗体）标记系膜细胞，同时用F4/80抗体标记巨噬细胞，用Thy-1抗体标记T细胞，以区分GFP阳性细胞的类型。

MHC Class II 抗体的应用：

在本研究中，使用了BMA Biomedicals品牌的MHC Class II 抗体（货号：T-2106，Clone ER-TR3）来检测肾小球内浸润的免疫细胞是否表达MHC Class II分子。这一抗体对于识别抗原呈递细胞（如树突状细胞、巨噬细胞和活化的T细胞）具有重要意义。

通过与GFP阳性细胞的共定位分析，进一步确认了GFP阳性细胞并非活化的免疫细胞，而是可能来源于供体骨髓干细胞的系膜细胞。

三、 实验结果

骨髓干细胞的植入与分化：

流式细胞术结果显示，受体小鼠的脾脏淋巴细胞和骨髓细胞在移植后逐渐被供体来源的GFP阳性细胞替代。

组织学分析表明，从移植后4周开始，GFP阳性细胞在肾小球内逐渐增多，且主要位于系膜区。

免疫组化染色显示，部分desmin阳性的系膜细胞同时表达GFP，证实了骨髓干细胞可以分化为系膜细胞。

GFP阳性细胞的性质：

GFP阳性细胞在肾小球内并非巨噬细胞或T细胞，因为它们不表达F4/80或Thy-1抗原，且仅少数GFP阳性细胞表达巨噬细胞清道夫受体或MHC Class II分子。

体外培养的肾小球细胞实验进一步证实了GFP阳性细胞具有系膜细胞的特征，如表达desmin和对血管紧张素II（AngII）刺激的收缩反应。

四、结论与讨论

骨髓干细胞分化为系膜细胞的潜力：

本研究首次证明了骨髓干细胞具有分化为肾小球系膜细胞的潜力，这一发现为肾小球疾病的发病机制提供了新的视角。

骨髓干细胞可能通过替代受损的系膜细胞或促进系膜细胞的再生来减轻肾小球损伤，为骨髓移植治疗肾小球疾病提供了理论依据。

MHC Class II 抗体的应用前景：

MHC Class II 抗体的使用不仅有助于区分GFP阳性细胞是否为活化的免疫细胞，还为进一步研究肾小球内免疫细胞亚群及其功能提供了有力工具。

在未来的研究中，该抗体可用于监测肾小球疾病中免疫细胞的浸润情况，评估疾病活动度和治疗效果。

临床与科研意义：

骨髓干细胞在肾小球疾病治疗中的应用前景广阔，未来的研究应聚焦于优化骨髓移植方案、探索骨髓干细胞分化的具体机制以及评估其在不同肾小球疾病模型中的疗效。同时，MHC Class II 抗体的广泛应用将为肾小球疾病的免疫病理学研究提供新的思路和方法。

五、 未来研究方向

进一步研究骨髓干细胞分化为系膜细胞的具体分子机制和调控因素。探索不同疾病模型下骨髓移植的治疗效果及安全性。评估骨髓干细胞移植与其他治疗方法的联合应用效果。深入研究MHC Class II 抗体在肾小球疾病中的免疫监测和疗效评估中的作用。

BMA Biomedicals品牌Monoclonal Antibody To Mouse MHC Class II

小鼠MHC II类单克隆抗体（货号：T-2106）

单克隆抗体ER-TR3：研究T辅助细胞的重要工具

单克隆抗体ER-TR3是ER-TR系列单克隆抗体（包括ER-TR3、ER-TR2、ER-TR1）中的一员，它们能够识别由小鼠H-2复合体中的Ia区域编码的MHC II类抗原，该区域在人类中对应于HLA-DR区域。这些抗体是研究T辅助细胞与II类抗原呈递细胞（包括树突状细胞、B细胞和巨噬细胞）相互作用的重要工具。通过这些抗体，研究人员能够更深入地了解这些细胞间复杂的相互作用机制。

此外，由于ER-TR3等抗体还能够标记胸腺中的基质细胞，因此它们也为研究T辅助细胞的发育提供了新的可能性。胸腺是T细胞发育的主要场所，基质细胞在其中扮演着关键角色，通过分泌细胞因子和提供适当的微环境来支持T细胞的发育和分化。因此，ER-TR3等抗体不仅有助于揭示T辅助细胞与抗原呈递细胞间的相互作用，还能够探索T辅助细胞在胸腺中的发育过程。

综上所述，单克隆抗体ER-TR3是研究T辅助细胞功能及其发育过程的重要工具，为免疫学领域的研究提供了有力的支持。

Product number: T-2106

Host species: Rat IgG2b

Clone: ER-TR3

Quantity: 150 ug

Format: Affinity purified, lyophilized

Reconstitute by adding 0.5ml distilled water. This stock solution contains 0.3mg/ml IgG, phosphate buffered saline pH 7.2 (PBS), 5mg/ml bovine serum albumin (BSA) as a stabilizer and 0.09% sodium azide as a preservative.

Shelf-life: Original vial: 1 year at 4° - 8°C

Stock solution: 1 year at -20°C. Avoid repeated thawing and freezing.

Applications:Tested for immunohistochemistry (IHC); has been described to work in FACS.

Approximate working dilution for IHC:

Frozen sections: 1.5g/ml (1:200)

Paraffin sections: does not react on routinely processed paraffin sections.

Optimal dilutions should be determined by the end user.

Suggested positive control: Mouse spleen.

Immunogen: Murine thymic reticulum.

Antigen, epitope: MHC Class II antigens are heterodimers consisting of one-chain (31-34kDa) and one-chain (26-29kDa). The epitope has not been further characterized.

Antigen distribution

Isolated cells: The antigen is found on dendritic cells, B-cells and macrophages. The level of antigen detected by ER-TR1,ER-TR2 and ER-TR3 differs from strain to strain (see table below).

Tissue Sections: The antigen is found on B-cells, interdigitating cells and macrophages in peripheral lymphoid organs but is absent from T-cells. It is also expressed as a fine reticular pattern on stromal thymic cells of the cortex and as a

confluent pattern on stromal thymic cells of the medulla.

Specificity:

Mouse: cells expressing MHC class II antigens

Other species: negative on human, other unknown

Selected references：

Van Vliet, E., et al.: Monoclonal Antibodies to Stromal Cell Types of the Mouse Thymus. Eur. J. Immunol. 14, 524-529 (1984)

Van Vliet, E., et al.: Stromal Cell Types in the Developing Thymus of the Normal and Nude Mouse Embryo. Eur. J. Immunol. 15, 675-681 (1985)