Spherotech/艾美捷--顺磁性粒子STN-1：颗粒涂层程序技术说明

制备SPHERO?磁性颗粒 通过在单分散（即大小均匀）的聚苯乙烯芯颗粒上涂覆一层磁铁矿和聚苯乙烯。因此，Spherotech--SPHERO?磁性粒子是球形的，本质上是顺磁性的。它们的大小也非常均匀。这些磁性颗粒的磁铁矿含量可以调节，但一般来说，对于1微米颗粒，磁铁矿含量约为10%至15%。磁性颗粒可以很容易地从悬浮液中磁性分离出来。这些颗粒从磁铁中取出时变得无磁性，即使在反复暴露于强磁场后也不会保留任何可检测的磁性。SPHERO?磁珠可用于细胞分离、亲和纯化、DNA探针测定、磁珠EIA等。

目前，有几种将生物配体附着在聚苯乙烯颗粒上的方法。这些方法包括吸附到普通聚苯乙烯颗粒上，共价附着在表面功能化颗粒上，以及将目标配体附着在预先包被结合蛋白（如链霉亲和素、蛋白 A 或蛋白 G）的颗粒上。

以下信息解释了配体与聚苯乙烯颗粒连接的通用方案。这些协议易于优化，可满足特定应用的要求。以下方案由 Spherotech 开发，以方便 SPHERO? 微粒用户。它们只能用作初始条件。Spherotech 鼓励通过改变缓冲液、pH 值或试剂浓度来优化包被条件。

通常，多克隆抗体通过吸附包被到聚苯乙烯颗粒上，而不使用任何偶联剂。多克隆抗体与聚苯乙烯颗粒的结合力很强。但是，应注意不要使抗体超载到颗粒上。如果发生过载，包被的抗体将在储存过程中发生浸出。这是由于与抗体分子与聚苯乙烯颗粒表面的相互作用相比，抗体分子之间的相互作用较弱。如图1所示，被动吸附的合适抗体与颗粒比为62.5μg/mL的0.5%w/v（5.0mg固体/mL）的0.8μm聚苯乙烯颗粒1。

艾美捷Spherotech--Sphero技术说明：

使用被动吸附的颗粒涂层

使用EDC和共价偶联的具有配体或蛋白质的氨基颗粒

羧基颗粒与亲和素或其他蛋白质使用EDC共价偶联

使用两步EDC偶联协议的共价偶联

使用亲和偶联的生物素化蛋白的亲和素颗粒

使用溴化氰 （CNBr） 将蛋白质与羟基颗粒共价偶联

二甲氨基颗粒与DNA使用离子相互作用偶联

使用 SPDP 修饰氨基蛋白共价偶联的配体

多糖的高碘酸氧化和与氨基颗粒的偶联

具有氨基修饰寡核苷酸的羧基聚苯乙烯颗粒

Spherotech公司是全球知名的微球产品生产商之一。Beckton Dickinson(BD)公司即用Spherotech的Rainbow荧光微球来对其流式细胞仪进行灵敏度的校验。Spherotech公司生产的微球广泛的应用于生物医学研究和诊断，包括免疫荧光和免疫酶学检测等。其微球适用于荧光显微镜技术、激光共聚焦(Confocal)技术、流式细胞术、影像细胞术、磁性细胞分离技术、磁珠酶免测定法(EIA)等多种检测方法。Spherotech常规生产高质量的乳胶微球、荧光微球、顺磁性微球、铁磁性微球和多种有色微球，这些微球表面可根据应用的需要添加不同的功能基团(如羧基和氨基等)。此外，Spherotech公司还生产各种包被有抗体或配体，如亲合素、链霉亲合素和生物素等的微球，用于免疫学的研究和临床。  艾美捷科技是Spherotech的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。