探索SUMOstar技术：优化蛋白表达与纯化的创新解决方案

背景： 在细胞内，蛋白质通过泛素标记定位于26S蛋白酶体进行降解，而细胞蛋白质则受到类似泛素的修饰物SUMO（小泛素样修饰物）的共价修饰调节，影响着核运输、信号传导和蛋白稳定性等细胞过程。泛素类蛋白主要包括SUMO、Rub1（又称Nedd8）、Apg8和Apg12，以及泛素结构域蛋白（UDPs）如parkin、RAD23和DSK2，它们具有泛素相关但独立的结构域，不发生共价连接。SUMO化在真核系统中广泛存在，保守性高，促进蛋白-蛋白和蛋白-DNA相互作用，以及靶标蛋白的定位和稳定性。酵母SUMO（Smt3）与目标蛋白融合可显著增强表达并促进正确溶解与折叠。 

SUMOstar作为不可切割的SUMO形式，主要服务于真核系统，而其细菌版本则用于初期测试并后续转为真核系统载体。泛素和SUMO的共价连接提高融合蛋白的产量与溶解度，而将高稳定性泛素或SUMO附加到合作蛋白可提升重组融合蛋白的生成量。总体而言，泛素和类泛素结构域的融合可增强溶解度，其折叠结构的不同性质使其对低溶解度的合作蛋白具有类似洗涤剂效果。 

泛素融合长期以来用于增强蛋白表达，但其在蛋白纯化方面受泛素水解酶或其它蛋白酶的低效问题困扰，因此需要更高效的蛋白酶如Ulp1来解除融合蛋白与泛素的连接。最近，SUMO蛋白酶Ulp1被认为是一种优秀的纯化工具，特别适用于大肠杆菌表达的重组SUMO融合蛋白。相比其他蛋白酶，Ulp1表现更出色，识别Smt3结构并裂解连接，不受N-末端序列影响（除脯氨酸外），且不在蛋白内部裂解。基于ULP1平台，LifeSensors公司研发了一种特异的SUMOstar蛋白酶，示有显著潜力。   

SUMOstar表达和纯化系统的优势： 

1）SUMOstar融合可以显著增强重组蛋白表达。 

2）SUMOstar融合可以增强溶解度。 

3）未知有SUMOstar蛋白酶在融合的感兴趣蛋白内部裂解的情况。 

4）SUMOstar蛋白酶裂解和随后的纯化可产生具有期望N-末端的原生蛋白。   

艾美捷作为LifeSensors在中国的区域独家代理，为您推荐Lifesensors品牌的SUMOstar系列产品，助你发表多篇高分文章。

SUMOstar Protease产品信息 

纯度：SDS-PAGE和RP-HPLC检测纯度>95% 

分子量：26,481.3Da 

特异活性：1 U可在37摄氏度1小时内裂解>90 ?g SUMOstar-GFP 

物理状态：液态，浓度10U/?L 

数量：500、1000、5000或10,000单位 

储存：-80摄氏度。避免反复冻融循环

LifeSensors成立于1996年，位于美国宾夕法尼亚州费城，是一家为药物发现与研究提供方法和可行性技术方法的生物技术公司，目前主要的产品有400多种，其产品主要覆盖泛素和泛素蛋白酶体通路等科学应用领域，并且公司拥有两大独家技术平台：用于细胞信号和药物发现的泛素蛋白酶体系统(UPS)，以及增强目的蛋白在大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞中表达与纯化的SUMO融合表达系统，此外，LifeSensors还为泛素的蛋白质组学提供众多定制技术服务，并且已经开发了各种各样的测定细胞中的生理底物或生物标志物的方法。   艾美捷作为LifeSensors在中国的区域独家代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的LifeSensors的产品。