QuickZyme-Sensitive 组织胶原测定，方法快速简单

发布者：艾美捷科技发布时间：2024-07-12

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胶原蛋白是细胞外基质的主要成分之一。胶原蛋白生成的失调可能导致如纤维化（胶原蛋白过多）或骨关节炎（胶原蛋白过少）等病理状态。因此，在许多与疾病相关的研究中，测量胶原蛋白的生成是重要的。QuickZyme敏感组织胶原蛋白检测试剂基于羟脯氨酸的检测。羟脯氨酸是一种非蛋白质氨基酸，在哺乳动物中主要出现在胶原蛋白中。组织水解产物中的羟脯氨酸可以用作组织中胶原蛋白含量的直接测量。

胶原蛋白的测量从在6M盐酸中于95°C完全水解组织样本开始。在水解产物中，使用Prockop和Udenfriend描述的方法的改进版本（《分析生物化学》，1960年，1: 228-239）来定量羟脯氨酸残基。该检测测量样本中存在的总羟脯氨酸量，这代表了样本中存在的所有类型的胶原蛋白，而不会区分胶原蛋白的类型以及前胶原蛋白、成熟胶原蛋白和胶原蛋白降解产物。

与其他基于羟脯氨酸的检测相比，QuickZyme敏感组织胶原蛋白检测没有基质效应，也不需要对水解产物进行稀释，从而能够在胶原蛋白浓度较低的小样本中进行测量。该检测方法简单，并且不需要酸水解后的干燥步骤，这通常需要特殊设备。

现在可以在胶原蛋白水平较低的小组织样本中轻松确定胶原蛋白

艾美捷QuickZyme Biosciences敏感组织胶原蛋白检测试剂盒基于通过胶原蛋白的酸水解获得的羟脯氨酸残基的定量比色测定。敏感组织胶原蛋白检测没有基质效应，也不需要对水解产物进行进一步稀释，从而能够在如肝脏这样的胶原蛋白浓度较低的小样本中进行测量。该检测方法简单，并且不需要酸水解后的干燥步骤，因此在水解步骤之后，可以在快速（小于2小时）且简便（96孔板格式）的检测中进行。

数据分析：

数据分析有几种可选的方法。建议使用一个软件包来处理数据，该软件包采用回归曲线拟合程序。如果没有可用的软件包，可以按照以下方法手动计算胶原蛋白浓度。

1、计算每个标准品或样本的重复读数的平均值，并从所有读数中减去空白的平均值。

2、通过在y轴上绘制每个标准品的平均A570（减去空白）与x轴上的胶原蛋白含量相对应（0-6.25–12.5–25-50–100–200–300微克胶原蛋白/毫升水解产物），创建一个标准曲线。在图表上的点之间画出最佳拟合的线性化曲线。使用这个标准曲线将测试样本的A570值转换为微克/毫升胶原蛋白。这样就可以得到水解样本中的胶原蛋白浓度。如果水解后包括了稀释步骤，这个浓度应该乘以稀释因子，以得到水解样本中的胶原蛋白浓度。

典型的胶原蛋白标准曲线