PhotoGel 95% DS 甲基丙烯酸酯明胶的准备说明

三维（3D）凝胶使得可以研究细胞外基质（ECM）的力学特性，如密度和刚度，对细胞发育、迁移和形态的影响。与二维系统不同，3D环境允许细胞延伸与所有细胞表面的整合素同时相互作用，导致特定信号通路的激活。凝胶的硬度或刚度也会在3D与2D环境中对细胞迁移产生不同影响。此外，在3D系统中，由于基质纤维与细胞延伸的缠绕，可能会产生整合素无关的机械相互作用，而在细胞附着在平坦表面的2D系统中不会出现。

Advanced BioMatrixPhotoGel 95% DS 甲基丙烯酸酯明胶是一种纯化明胶甲基丙烯酸酯套装，可提供类似天然的3D明胶凝胶，并具有独特属性，可在不同浓度下制备，并通过紫外交联提供不同的凝胶硬度。尽管它是变性胶原蛋白，但明胶保留了许多天然结合基序，如RGD和MMP位点。PhotoGel? UV套装包括明胶甲基丙烯酸酯和紫外激活的光引发剂。

艾美捷PhotoGel 95% DS 甲基丙烯酸酯明胶，2 x 500 mg，带 Irgacure 套件（ABM-5215-1KIT）准备说明：

注意：采用无菌操作方式，在整个胶原蛋白和其他溶液的制备和处理过程中保持产品的无菌性。

注意：以下说明适用于10%明胶甲基丙烯酸酯溶液。推荐浓度为5-20%。

1. 将10毫升无菌温暖的1倍PBS或1倍细胞培养基加热至>60°C。

2. 将5毫升加热的溶液加入含有500毫克冻干明胶甲基丙烯酸酯的琥珀色小瓶中。

3. 在摇床或旋转板上混合，直至完全溶解。如有可能，请保持温暖（>37°C）（例如将旋转器放入孵育箱中）以帮助完全溶解。

4. 向含有100毫克Irgacure的小琥珀瓶中加入1毫升纯甲醇，并旋转混合。（注意 - 溶解的Irgacure的保质期为2周。只需在10%溶液中溶解所需量的Irgacure粉末）

5. 通过将所需明胶总体积乘以0.01来计算所需光引发剂的体积。（如果要直接加到5毫升中，您将添加0.05毫升的Irgacure）

6. 将计算出的光引发剂体积加入所需量的明胶溶液中，并彻底混合。

7. 将您的细胞加入明胶/光引发剂溶液中。

8. 将您的明胶/光引发剂/细胞溶液分装到所需的培养皿中（例如6孔板、48孔板）。

9. 对于紫外线交联，将印刷结构直接放置在365纳米紫外光交联光源下。更长的暴露时间可以实现更多的交联，尽管每种细胞类型能承受不同程度的紫外光和自由基（由光引发剂产生）介导的交联。任何多余的材料都可以冷藏保存。材料会凝胶化。将其加热至>30°C，使其再次变为液态。

存储/稳定性：产品在冰袋中运送。收到后，将明胶甲基丙烯酸酯存储在-20°C。将Irgacure存储在2至10°C之间。