Anti-Phosphoserine/threonine(通用磷酸化抗体-抗磷酸化丝氨酸/苏氨酸):
特定丝氨酸或苏氨酸残基的磷酸化是调节大多数蛋白质活性的重要翻译后修饰。多种细胞信号通路的刺激激活了介导这些蛋白质修饰的受体和非受体ser/thr激酶。能够检测磷酸丝氨酸-吗啉硫肽残基的抗体是描述国外一系列磷酸化蛋白翻译后状态变化的极好工具。免疫沉淀感兴趣的蛋白质,然后使用抗磷酸丝氨酸抗体检测磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸,通常用于将磷酸化状态的变化与蛋白质活性的变化联系起来。
参考资料:Hunter T.(1987) Cell. 50(6):823.Krishna, R.G. & Wold, F. (1993) Adv Enzymol Rel Areas Mol BiolYaffe, 67:265.M.B. & Elia, A.E. (2001) Curr Opin Cell Biol 13, 131-8.
左图:用calyculin A(100nM)处理30分钟(泳道1)然后用lambdaphosphatase处理(泳道2)的A431细胞的蛋白质印迹分析。印迹用抗磷酸丝氨酸/苏氨酸兔多克隆以1:1000进行探测。
右图:条形图显示抗磷酸丝氨酸/苏氨酸(PP2551)与多种磷酸丝氨酸和磷酸苏氨酸肽结合,但不显示含有未磷酸化丝氨酸或磷酸酪氨酸的对照肽。
免疫原:
抗磷酸丝氨酸/苏氨酸由一组从人类蛋白质序列设计的含有磷酸丝氨酸和磷酸苏氨酸的肽免疫原产生。所有使用的肽序列在许多物种中都是高度保守的。
缓冲和存储:
兔多克隆亲和纯化抗体在100μl磷酸盐缓冲盐水、50%甘油、1mg/ml BSA中提供,
和0.05%叠氮化钠。保存温度为20°C,可稳定保存1年。
艾美捷Anti-Phosphoserine/threonine(通用磷酸化抗体-抗磷酸化丝氨酸/苏氨酸)#PP2551特点:
将该抗体交叉吸附到未磷酸化的肽上,然后使用磷酸丝氨酸和磷酸硫肽的混合物(无载体)进行亲和纯化。该抗体通过蛋白质印迹、免疫细胞化学和ELISA检测许多丝氨酸或苏氨酸磷酸化蛋白
引用文献:
Xue, J. et al. (2019) J Integr Plant Biol. May 14.12824.
WB: Arabidopsis
Xiao, N. et al. (2019) FASEB J. 33(1):163-174.
IP: Hek293 cells
Unger, A. et al. (2017) Acta Neuropathol Commun. 5(1):72.
WB: mouse skeletal muscle
Liu, J. et al. (2016) Cell. 167(4):1052–1066.e18.WB: HEK293 transfectantsTsai, C.F. et al. (2015) J Agric Food Chem. 9;63(48):10388
WB: Huh7 cells
Anti-Phosphoserine/threonine(通用磷酸化抗体-抗磷酸化丝氨酸/苏氨酸)相关研究:
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