PNA Bio-CRISPR/Cas9（RGEN）合成定制服务

PNA Bio提供定制的CRISPR/Cas9（RGEN）合成服务，无论是否经过验证。

艾美捷PNA Bio-CRISPR/Cas9（RGEN）合成定制服务：

IVT sgRNA合成服务（aRGEN）

包括设计、脱靶搜索和合成

提供50微克冻干形式的sgRNA

注射/转染就绪

在琼脂糖凝胶中确认质量和数量

时间线：2周

sgRNA载体合成服务（dRGEN）

包括设计、脱靶搜索和合成

提供sgRNA和Cas9的表达质粒

时间线：2周

提供与GFP/HygroR和RFP/PuroR卡盒共表达的Cas9载体，这些载体在CMV或EF1a启动子下用于筛选

sgRNA验证服务

客户提供基因名称、物种和项目目标（KO、KI等）

包括设计、脱靶搜索以及4~8个gRNA载体的合成

将CRISPR/Cas9转染到细胞中，并执行错配敏感的核酸酶检测，以找到Z有效的核酸酶

sgRNA以表达质粒形式（dRGEN）或RNA形式（aRGEN）提供

也提供PCR引物、PCR条件和用于KO筛选的错配敏感的核酸酶检测

时间线：3~6周

Cas9载体

CV01 & CV11: Cas9（CMV或EF1a启动子）

CV02 & CV12: Cas9-HygR-GFP（CMV或EF1a启动子）

CV03 & CV13: Cas9-RFP-PuroR（CMV或EF1a启动子）

导向RNA（gRNA）设计

通常，寻找没有1个碱基和2个碱基错配的gRNA序列，并包含45~70% GC含量。如果无法避免脱靶，S选靠近PAM的错配，而不是位于gRNA 5'端的错配。请注意，非典型PAM（-NAG，-NGA）也可以被切割。

PNA Bio已经开发了PNA Bio的gRNA工具，它可以输出脱靶序列、GC含量和其他特征。您也可以使用公开可用的工具进行各种选项的搜索。

Cas-Designer

ChopChop

E-CRISP

Cas-Offinder（查看脱靶列表）

eGFP对照sgRNA

已验证在体外和体内切割eGFP

注射就绪形式，冻干粉末

也提供eGFP质粒和Cas9蛋白作为体外切割检测的阳性对照试剂

可用尺寸：20微克或100微克（20微克x 5管）

目录编号：AR04

PNA Bio-CRISPR/Cas9（RGEN）合成定制服务文献：

Laminar flow downregulates Notch activity to promote lymphatic sprouting. Choi D et al. (2017)  J. Clin Investigation. In press.

Generation and characterization of tamoxifen-inducible Pax9-CreER Knock-In Mice using CrispR/Cas9. Jifan F et al. (2016) Genesis 54(9):490-496.

Efficient delivery of nuclease proteins for genome editing in human stem cells and primary cells. Liu J et al. (2015) Nat Protoc. 10:1842-1859.

Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins. Kim S et al. (2013) Gen Res. 24:1012-1019.

Rapid and highly efficient mammalian cell engineering via Cas9 protein transfection. Liang X et al (2015) J Biotech. 208: 44-53.

艾美捷科技是PNA Bio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。