PNA Bio/艾美捷生成敲除和敲入细胞定制服务

生成敲除和敲入细胞的过程：

PNA Bio提供经济的细胞系生成服务（敲除和敲入），能够及时地生成工程化细胞系。下面展示了工程化细胞系生成的过程。

设计并合成4到8个gRNA载体

通过错配敏感核酸酶检测选择Z有效的工程化核酸酶

合成报告载体以富集基因编辑事件的细胞

优化转染方案

设计敲入项目的供体载体

通过MACS、FACS或次黄霉素抗性选择池（选项：在选定的池中验证效率）

单细胞克隆

使用T7E1检测和/或F-PCR筛选克隆

通过TA克隆和测序确认纯合子敲除

PNA Bio的优势：

多年使用ZFN、TALEN和CRISPR/Cas9系统的经验

内部开发的软件，设计具有Z大活性和Z小非靶点效应的gRNA序列

健全的检测系统，筛选和选择Z优化的工程化核酸酶

报告系统以富集基因编辑的细胞（比传统方法提高3到20倍）

PNA Bio生成的一些敲除或敲入细胞系

常用细胞：HEK293、NIH3T3、CHO细胞

人类癌细胞：HeLa、HCT116、SKBR3、Hep3B、HepG2、MCF7、K-562、H-358细胞

小鼠细胞：Pan02、CT26WT细胞

神经细胞：Sy5y、PC12细胞

PNA Bio已经成功地在一轮中生成了高达5个拷贝的敲除克隆。

艾美捷PNA Bio-生成的敲除克隆示例：

KO克隆产生的例子：两个KO克隆的测序分析和含有三个错配的五个脱靶位点的T7E1分析。

PNA Bio-敲除和敲入细胞服务：

敲除细胞系服务：

提供至少两个独立的敲除（KO）克隆，并确认无支原体污染

时间线：4至7个月

敲入细胞系服务：

提供至少两个独立的克隆，并确认无支原体污染

包括供体载体的设计和合成

时间线：5至7个月

艾美捷科技是PNA Bio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。