【Biogradetech热销】PKH26细胞连接试剂盒（用于常规细胞膜标记）

PKH26是一种膜标记探针，结构上带有一长脂肪族尾巴，能稳定插入细胞膜脂质区域。PKH26最大激发波长为551nm，最大发射波长是567nm，与罗丹明或PE检测系统兼容。也可能用标准荧光素（Fluorescein）激发滤片，但荧光强度可能会有些降低。PKH26具最长的体内半衰期，超过100天，非常适用于体内细胞示踪、细胞增殖研究和其他长期实验。

艾美捷独家代理的Biogradetech的PKH26细胞连接试剂盒（用于常规细胞膜标记）（PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling， Cat：B-CHK104）是一款基于荧光探针PKH26，用于常规细胞膜标记的检测试剂盒，适用于体外细胞标记，体外细胞增殖以及长期的体内细胞跟踪研究等。

试剂盒中包含一管PKH26染料以及一管稀释液C（Diluent C），稀释液C是本试剂盒配套提供的一种水溶性溶液，特别设计的一种标记媒介能维持细胞活力，同时大化染料溶解性和标记过程中的染色效率。Diluent C对哺乳动物细胞来说是等渗的，不含去污剂或有机溶剂，也不含生理盐和缓冲剂。根据细胞类型，染料标记后膜的内在化程度，标记细胞可能呈现不同的状态，从明亮，到均匀点状或斑驳状。然而，PKH26荧光在生理范围内不依赖于pH，且每个细胞的荧光强度通常不受染料位置的影响。

PKH26主要应用类型包括：

1. 细胞增殖分析

通过测量细胞的荧光强度和分布，可以估算细胞的增殖代次、增殖速率、增殖周期等参数。这种方法可以用于检测不同条件下细胞的增殖能力，如抗原刺激、药物干预、基因修饰等。也可以用于识别不同增殖能力的细胞亚群，如干细胞、祖细胞、癌细胞等。

2. 细胞迁移分化跟踪

通过将标记的细胞移植到体内或体外的目标组织中，可以观察细胞在活体组织中的迁移轨迹和分化状态。这种方法可以用于研究干细胞治疗、组织再生、肿瘤转移等过程。

3. 细胞间相互作用检测

通过观察不同荧光标记的细胞之间的接触、融合、转移等现象，可以研究细胞间的信号传递、功能协调、物质交换等机制。这种方法可以用于研究免疫反应、血小板功能、病毒感染、纳米颗粒摄取等过程。

【染色流程】：

【注意事项】：

1）通过分配脂质染料进入细胞膜来进行标记。标记强度是染料浓度和细胞浓度共同作用的一种功能，且不会饱和。因此，用来标记的染料浓度需要有限，过度标记细胞会引起细胞膜完整性丧失和降低的细胞复原能力。

2）以下步骤适用于体外或离体标记干细胞、淋巴细胞、单个核细胞、内皮细胞、神经元或任何需要将染料插入细胞膜脂质区的其他细胞类型。而体内标记、血小板标记，或在含非吞噬细胞的群体内选择性标记吞噬细胞，需对步骤做适当修改。

3）需在单克隆抗体染色前进行常规细胞膜染色。4℃单克隆抗体染色过程中膜染料仍能维持稳定。然而，如果单抗标记后再室温下进行常规细胞膜染色，极有可能引起单抗的“盖帽”发生。

4）以下步骤中用到的细胞和染料浓度是推荐用的起始浓度，广谱适用于各种细胞类型。用户需根据自身细胞类型和实验目的确定加的染料和细胞浓度，通过对染色后细胞活力（比如典化丙啶排斥），荧光强度，染色均匀性和对待研究细胞功能无影响等方面来综合评估。

5）PKH26染色过程中需避免叠氮化物或代谢毒物的存在。

6）虽然粘附在固相基质上的贴壁细胞可能被标记，使用单细胞悬浮液能得到更匀质的染色结果。染色前使用蛋白消化酶比如胰酶/EDTA处理贴壁或结合细胞制备成分散的单细胞悬液能得到好的染色结果。

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