PKMITO 系列的Red、Orange及Deep Red具有非常低的化学毒性、光学毒性和优秀的线粒体定位能力。综合这些优异的性能,PKMITO 系列产品非常适合用于线粒体成像,尤其在SIM和STED等超分辨成像和细胞分选等领域。除此之外,PKMITO? 系列产品也已经在斑马鱼等小动物实验中用于线粒体成像。
目前Genvivo证明了该探针与常规免疫标记和其他常用的固定样品荧光标记策略的兼容性。此外,我们发现PKMO FX促进了相关的超分辨率光学和电子显微镜,使多色荧光图像和透射电镜图像通过线粒体模式的相关性。我们的探针进一步扩展了线粒体工具包,用于纳米分辨率的多模态显微镜。
艾美捷Genvivo可固定线粒体超分辨探针(#PKMOF-1)可参考以下步骤:
1.在 PK Mito Red/ Orange/ Deep Red 中加入 100 μL(25 nmol)/ 20μL(5 nmol)新鲜干燥的 DMSO,混合均匀,得到 250 μM 母液。
2.将培养基预热至 37 ℃,将 PK Mito Red/ Orange/ Deep Red 母液按照1000- 5000倍稀释比例加入到预热的培养基中,稀释后的染液建议尽快使用,久置后可能导致部分染料分解或沉淀。
3.吸去细胞原有的培养基,更换为稀释好的培养基染液,在培养箱中孵育15 分钟。
4.用预热的培养基清洗细胞一至两次,即可用于荧光成像。
注:我们建议对大多数细胞系和原代细胞使用 200-300 nM,如HeLa、COS7、U-2OS、Vero细胞、原代神经元、脂肪细胞和肝细胞;对组织染色使用500-600 nM。不同样品染色条件有所差异,建议起始染色方法为 1000 倍稀释,15 分钟染色,请根据实际染色效果进行调整。
目前PKMITO 系列主要供应3款不同颜色的探针:
可固定线粒体超分辨探针文献参考:
1. Yang, Zhongtian, et al. "Cyclooctatetraene-conjugated cyanine mitochondrial probes minimizephototoxicity in fluorescence and nanoscopic imaging." Chemical Science (2020).
2. Liu, Tianyan, et al. "Multi-color live-cell STED nanoscopy of mitochondria with a gentleinnermembrane stain." Proceedings of the National Academy of Sciences 119.52 (2022): e2215799119.
3. Chen, Jingting, et al. "An aldehyde-crosslinking mitochondrial probe for STED imaging infixedcells."Proceedings of the National Academy of Sciences 121.19 (2024): e2317703121.
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